La cromatografía de intercambio iónico es un caso especial de cromatografía iónica que le permite separar iones y moléculas polares en función de las cargas de las moléculas que se separan .
Este tipo de cromatografía le permite separar casi cualquier molécula cargada, incluidas: proteínas grandes , moléculas pequeñas de nucleótidos y aminoácidos . La cromatografía de intercambio iónico se usa a menudo como el primer paso en la purificación de proteínas .
Para la cromatografía de intercambio iónico, se utilizan polímeros sintéticos, generalmente a base de poliestireno y polifenoles. Los grupos responsables de los procesos de intercambio iónico se introducen con mayor frecuencia como sustituyentes en el anillo de benceno de los monómeros. Las resinas de intercambio iónico disponibles en el mercado se encuentran en forma de pequeñas perlas de polímero que deben empaparse en agua u otro eluyente antes de su uso [1] . El hinchamiento de la resina de intercambio iónico va acompañado de un aumento en la disponibilidad de grupos funcionales del polímero debido a la expansión de macromoléculas por moléculas eluyentes, como en la plastificación del polímero. El grado de hinchamiento de la resina de intercambio iónico se controla tanto por la longitud de las macromoléculas como por el grado de reticulación de la matriz polimérica.
La cromatografía de intercambio iónico separa las moléculas en función de las interacciones iónicas . La fase estacionaria tiene grupos funcionales cargados que interactúan con las moléculas ionizadas analizadas de carga opuesta. Esta variante de cromatografía se clasifica en dos tipos: cromatografía de intercambio iónico catiónico y aniónico:
Chromatofocusing (CF) es un método de cromatografía de intercambio iónico basado en la elución con un gradiente de pH interno (creado dentro de la columna). Actualmente, se utilizan dos técnicas para la formación de gradientes de pH: inducción y cromatoenfoque "clásico". La CP generalmente se usa para separar objetos biológicos: proteínas, péptidos, aminoácidos, con menos frecuencia colorantes azoicos y otros compuestos zwitteriónicos. A principios de la década de 1990, P. N. Nesterenko y A. V. Ivanov propusieron un método para la concentración y separación de metales de transición en una sola columna utilizando la técnica de cromatoenfoque. Tradicionalmente, para estos fines, se forman gradientes de pH descendentes en adsorbentes de intercambio aniónico.