La siembra ( bakposev ) es uno de los métodos estacionarios de cultivo de microorganismos en medios nutritivos, que se utiliza para diagnósticos culturales en microbiología médica, así como para estudiar propiedades bioquímicas y biológicas para diversos fines biotecnológicos. Dependiendo del contenido de bacterias estudiadas en la muestra, la inoculación se realiza en medios nutritivos densos (para obtener colonias aisladas y determinar la pureza del cultivo). Si el contenido de microorganismos en el material de prueba es insignificante, entonces la inoculación se lleva a cabo en medios de enriquecimiento líquidos. Existen diferentes métodos de siembra [1] .
Los métodos especiales se caracterizan por agregar un componente específico o cambiar la base.
Los métodos electivos se caracterizan por obtener crecimiento únicamente del microorganismo de interés.
Permitir la identificación de tipos individuales, especies y grupos de bacterias.
Para cultivos [2] , se utilizan asas microbiológicas , menos frecuentemente agujas y espátulas. En la mayoría de los casos, se utiliza un tubo de ensayo y una placa de Petri para el cultivo . El bucle bacteriano es una herramienta universal para sembrar cultivos . Además, se usa una aguja bacteriana especial para sembrar con una inyección, y se usan espátulas de metal o vidrio para sembrar en placas de Petri . Para la inoculación de materiales líquidos, junto con el asa, se utilizan pipetas graduadas y Pasteur .
Al sembrar, toman un tubo de ensayo con la mano izquierda y con la derecha, agarrando firmemente el corcho con los dedos anular y quinto, lo sacan. Sosteniendo el lazo con los otros dedos de la misma mano, primero en posición horizontal y luego en posición vertical , se lleva a una llama abierta y se quema al rojo vivo . El inóculo se recoge con un asa enfriada, después de lo cual el tubo de ensayo se cierra con un corcho, manteniendo previamente el borde del tubo de ensayo sobre la llama de una lámpara de alcohol . El corcho no debe quemarse. Luego, se introduce un asa con inóculo en el tubo de ensayo con agar inclinado, bajándolo hasta el condensado en la parte inferior del medio, y se distribuye el material en zigzag sobre la superficie inclinada del agar. Después de quitar el lazo, queme el borde del tubo de ensayo y ciérrelo con un corcho. El lazo se flambea en la llama de un mechero y se coloca en un trípode con el mango hacia abajo. Los tubos de cultivo se firman previamente , indicando la fecha de inoculación, el número del estudio y el nombre del cultivo.
Cultivos "césped" producidos en un medio nutritivo denso en una placa de Petri. Para ello, habiendo abierto ligeramente la tapa con la mano izquierda, se aplica el inóculo con un asa o pipeta sobre la superficie del agar nutritivo según el método Drygalsky. Después de la incubación de la siembra, aparece un crecimiento continuo uniforme de bacterias con su división en colonias. La identificación de cultivos bacterianos aislados se lleva a cabo mediante el estudio de la morfología de las bacterias, sus características culturales, bioquímicas y otras características inherentes a cada especie.
Una colonia es una acumulación aislada visible de representantes de un tipo de microorganismos, formada por la reproducción de una unidad formadora de colonias ( UFC ) en un medio nutritivo sólido (en la superficie o en su profundidad). Las colonias de bacterias de diferentes especies difieren entre sí en su morfología, color y otras características culturales.
Las colonias [3] difieren en tamaño, forma, color, consistencia, contorno de borde, estructura y carácter superficial:
En un medio nutritivo líquido, algunos cultivos bacterianos dan una turbidez difusa, mientras que otros se caracterizan por un crecimiento parietal cercano al fondo. Algunos cultivos forman películas en la superficie del medio, otros forman un precipitado en el fondo del tubo.
El cultivo de anaerobios difiere significativamente del cultivo de aerobios : dado que la atmósfera contiene una cantidad significativa de oxígeno , se utilizan técnicas especiales de siembra, medios y un anaerostato para eliminarlo del medio ambiente [3] .