Tinción de Romanovsky-Giemsa
La versión actual de la página aún no ha sido revisada por colaboradores experimentados y puede diferir significativamente de la versión revisada el 15 de julio de 2019; las comprobaciones requieren 2 ediciones .La tinción de Romanovsky - Giemsa es un método citológico para teñir microorganismos , estructuras celulares y tejidos de varios tipos (incluida la sangre ) para su examen mediante microscopía óptica . Propuesto en 1904 [1] por Gustav Giemsa . En la versión del autor, el nombre del tinte es "Giemsasche Lösung für die Romanowsky Färbung" (solución de Giemsa para teñir según Romanovsky) [2] . Tiñe formaciones acidófilas en varios tonos de rojo, formaciones basófilas en colores que van del púrpura al azul.
Preparando el tinte
Antes de teñir los frotis, el tinte líquido terminado se diluye a razón de 1-2 gotas de tinte por 1 ml de agua destilada. Los frotis se tiñen durante 20-25 minutos a 37°C en una cámara húmeda (placa de Petri cerrada con un filtro humedecido en el fondo). Después de la tinción, los frotis se lavan con agua corriente, se secan al aire y se examinan por inmersión en aceite.
La mezcla colorante Romanovsky-Giemsa, que se basa en la pintura Romanovsky-Wright , en forma de polvo (colorante comercial) se disuelve en una mezcla de volúmenes iguales de alcohol metílico y glicerina (800 mg de colorante por 100 ml de disolvente ). ). El tinte se disuelve mal, por lo que es mejor molerlo con un solvente en una cantidad de 300 mg por 100 ml y luego, revolviendo, agregue el tinte hasta obtener la concentración deseada. La preparación del tinte suele tardar varios días. Es importante utilizar alcohol metílico químicamente puro y glicerina como disolventes, ya que las impurezas degradan las propiedades del tinte. En lugar de alcohol metílico, se puede utilizar alcohol etílico al 100 %. La mezcla colorante preparada se almacena en un lugar fresco y seco en un recipiente bien cerrado.
Solución estándar especial de Giemsa
- Composición del tinte:
Técnica de tinción
- Los frotis fijados en alcohol metílico se tiñen con una solución (1 ml de pintura líquida terminada + 2 ml de la solución tampón básica + 47 ml de agua destilada) durante 40-120 minutos (la duración de la tinción se selecciona empíricamente). Se usa tampón de fosfato, pero el pH del tampón depende del tipo de frotis: para un frotis de médula ósea - 5.8-6.0, para un frotis de sangre - 6.4-6.5, para la detección de protozoos - 6.8, plasmodio palúdico - 7, 0-7.2.
- Enjuagar con agua destilada, secar y examinar por inmersión.
Resultado de la coloración
Las bacterias se tiñen de rojo púrpura, el citoplasma celular de azul, los núcleos de rojo. Al teñir los protozoos, su citoplasma se vuelve azul y los núcleos se vuelven rojo violeta.
Resultados de la tinción de frotis de sangre .
- el citoplasma de los linfocitos se tiñe de azul azulado, sus núcleos, en colores que van del púrpura intenso al violeta;
- el citoplasma de los monocitos se tiñe en un color gris azulado turbio, sus núcleos, en una granularidad azurófila delicada de color rojo púrpura más claro;
- los gránulos de basófilos se tiñen de un intenso color azul-violeta;
- los gránulos de eosinófilos se tiñen de rosa anaranjado;
- los gránulos de neutrófilos se tiñen en colores que van del púrpura al violeta;
- los núcleos de los leucocitos son de color rojo púrpura con una estructura de cromatina claramente visible; los nucléolos se distinguen bien;
- granulómeros plaquetarios teñidos de rojo, hialómeros teñidos de azul;
- color rosa de la hemoglobina .
Véase también
Notas
- ↑ Giemsa G. Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Metilenozur-Metilenoblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatinfärbung. (Alemán) // Centralbl f Bakt, etc.: magazin. - 1904. - Bd. 37 . - S. 308-311 .
- ↑ Bezrukov A. V. Colorear según Romanovsky: sobre la cuestión de la prioridad / En el 120 aniversario del descubrimiento del efecto Romanovsky. - 12 s. (enlace no disponible)
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