Metodo biuret

El método de biuret  es uno de los métodos colorimétricos para la determinación cuantitativa de proteínas en solución. Desarrollado en 1949 por Gornall, Bardaville y David, ahora se usa poco en la práctica de laboratorio bioquímico (con la excepción de las pruebas médicas de proteínas) debido a su baja sensibilidad.

Principio

Se basa en la formación de un complejo biuret (tiene un color púrpura) de enlaces peptídicos de proteínas con iones de cobre divalentes. El método utiliza el llamado. reactivo de biuret, compuesto por KOH , CuSO 4 y citrato de sodio (o tartrato de sodio ). En el complejo resultante, el cobre está unido a 4 nitrógenos por enlaces de coordinación y a 2 oxígenos por enlaces electrostáticos. Un complejo completo se forma solo con péptidos que consisten en más de 4 residuos. La densidad óptica de la solución (directamente proporcional a la concentración del péptido) se determina a 540-560 nm.

Las ventajas del método incluyen su baja sensibilidad a sustancias extrañas, bajo error.

La sensibilidad del método es de 2-10 mg/ml.

Otros métodos

Literatura

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