Teñido con hematoxilina y eosina
La tinción con hematoxilina y eosina (tinción con hematoxilina-eosina) es uno de los métodos de tinción más comunes en histología . Es ampliamente utilizado en diagnósticos médicos , en particular en oncología para teñir tejido
extraído o biopsiado .
La tinción incluye el uso del colorante básico hematoxilina , que tiñe las estructuras de células basófilas en azul brillante, y la tinción de ácido alcohólico eosina Y , que tiñe las estructuras de células eosinofílicas en rojo-rosado. Las estructuras basófilas son generalmente aquellas que contienen ácidos nucleicos ( ADN y ARN ): el núcleo celular , los ribosomas y las regiones ricas en ARN del citoplasma . Las estructuras eosinofílicas contienen proteínas intracelulares y extracelulares , como los cuerpos de Lewy . El citoplasma es un ambiente eosinofílico. Los eritrocitos siempre se tiñen de rojo brillante.
Técnica de tinción con hematoxilina-eosina
- Se retira la parafina de los cortes en ortoxileno o tolueno , se lleva a cabo con alcoholes de concentración decreciente y se lleva al agua (dos porciones de xileno o tolueno - 3-5 minutos, 96° etanol - 3 minutos, 80° etanol - 3 minutos, 70° ° etanol - 3 minutos, agua destilada - 5 minutos).
- Teñido con hematoxilina durante 7-10 minutos (dependiendo de la madurez del tinte).
- Enjuague en agua destilada durante 5 minutos.
- Diferenciar en ácido clorhídrico al 1% en etanol de 70° hasta que las secciones se vuelvan marrones.
- Enjuague con agua destilada y luego con una solución débil de amoníaco (0,5 %) hasta que las secciones se vuelvan azules.
- Teñido con una solución acuosa de eosina durante 0,5-1 minuto (dependiendo del color deseado).
- Lavado en tres porciones de agua destilada para eliminar el exceso de eosina.
- Retire el agua de las secciones en una porción de etanol de 70°, dos porciones de etanol de 96°. Exposición en cada porción de alcohol - 2 minutos.
- Las secciones se clarifican en dos porciones de carbol-xileno (una mezcla de fenol fundido y xileno o tolueno en una proporción de 1:4 o 1:5) - 1 minuto.
- Los cortes se deshidratan en dos porciones de xileno o tolueno. Estancia rebanadas 2 minutos.
- Encierre las secciones en bálsamo canadiense o medio sintético para encerrar secciones histológicas.
Algunas estructuras no se tiñen bien con hematoxilina y eosina (generalmente hidrofóbicas ) y requieren otros métodos de tinción. Por ejemplo, quedan sin teñir zonas de células ricas en lípidos y mielina : los adipocitos , la vaina de mielina de los axones de las neuronas , la membrana del aparato de Golgi , etc.
Véase también
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