Fotoblanqueo

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El fotoblanqueo ( fotodesvanecimiento, blanqueamiento ligero ) es la destrucción fotoquímica de un fluoróforo . En microscopía , el fotoblanqueo puede dificultar la observación de moléculas fluorescentes , ya que estas últimas se destruyen con el tiempo cuando se irradian con luz que provoca fluorescencia.

El fotoblanqueo se puede utilizar antes de la aplicación de fluoróforos acoplados a anticuerpos para extinguir la autofluorescencia, reduciendo así el nivel de la señal de fondo.

El blanqueo de luz se puede utilizar para estudiar el movimiento o la difusión de moléculas, por ejemplo, utilizando ( ing.  FRAP , recuperación de fluorescencia después del fotoblanqueo ) o ( ing.  FLIP , pérdida de fluorescencia en el fotoblanqueo ).

La reducción del efecto del fotoblanqueo se puede controlar reduciendo la intensidad o la duración de la exposición a la luz, aumentando la concentración del fluoróforo, reduciendo la frecuencia (y la energía del fotón) de la luz absorbida o utilizando fluoróforos que son más resistentes a la degradación, como como Alexa o DyLight Fluor.

Duración

Dependiendo de su química particular, las moléculas pueden fotoblanquearse después de absorber solo unos pocos fotones, mientras que las moléculas más fuertes pueden pasar por muchos ciclos de absorción/emisión antes de descomponerse:

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