N-terminal

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N -Terminus ( del inglés  N-terminal ), también amino-terminal  , es el grupo amino del primer aminoácido con el que comienza una molécula de proteína o péptido [1] .

Cada aminoácido tiene un grupo amino y un grupo carboxilo . Los aminoácidos se unen entre sí a través de una reacción de deshidratación al agregar el grupo carboxilo de un aminoácido al grupo amino de otro. Por lo tanto, las cadenas polipeptídicas terminan con un grupo carboxilo libre, el extremo C-terminal , y comienzan con un grupo amino, el extremo N-terminal [1] .

Métodos para determinar el aminoácido N-terminal

Para determinar la naturaleza del aminoácido N-terminal se han propuesto varios métodos, en particular, el método de Sanger (F. Sanger), basado en la reacción de arilación del polipéptido 2,4-dinitrofluorobenceno (DNFB), que conduce a la formación de un aminoácido N-terminal derivado de 2,4-dinitrofenilo de color amarillo. La solución de polipéptido se trata con DNFB, que interactúa con el grupo NH 2 libre del aminoácido N-terminal del péptido.

Después de la hidrólisis ácida del producto de reacción, dinitrofenilpéptido, solo un aminoácido N-terminal se une al reactivo en forma de 2,4-dinitrofenilaminoácido (estable tras la hidrólisis). A diferencia de otros aminoácidos libres formados durante la hidrólisis del polipéptido, es de color amarillo. Se identifica por cromatografía.

Para determinar el aminoácido N-terminal, el método de Edman de la feniltiohidantoína es mucho más utilizado debido a su alta sensibilidad y la posibilidad de múltiples usos en la misma muestra. El fenilisotiocianato reacciona con el grupo α-NH2 libre del aminoácido N-terminal del polipéptido para formar feniltiocarbamoilpéptido.

Notas

  1. 1 2 Nelson, Cox, 2011 , pág. 128.

Literatura