| ditiotreitol | |
|---|---|
| General | |
Nombre sistemático |
( 2S,3S )-1,4-bis(sulfanil)butano-2,3-diol |
| química fórmula | C 4 H 10 O 2 S 2 |
| Propiedades físicas | |
| Estado | Blanco sólido |
| Masa molar | 154,253 g/ mol |
| Propiedades termales | |
| La temperatura | |
| • fusión | 42-43°C |
| • hirviendo | 125-130°C |
| Clasificación | |
| registro número CAS | 3483-12-3 |
| PubChem | 446094 |
| registro Número EINECS | 222-468-7 |
| SONRISAS | C([C@H]([C@@H](CS)O)O)S |
| InChI | PulgadasI=1S/C4H10O2S2/c5-3(1-7)4(6)2-8/h3-8H,1-2H2/t3-,4-/m1/s1VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N |
| CHEBI | 42170 |
| ChemSpider | 393541 |
| Los datos se basan en condiciones estándar (25 °C, 100 kPa) a menos que se indique lo contrario. | |
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El ditiotreitol (dithiothreit, DTT, inglés DTT ) es un agente reductor de bajo peso molecular, también conocido como reactivo de Cleland . El nombre de la molécula proviene del azúcar de cuatro carbonos - treosa .
El ditiotreitol es un agente reductor muy fuerte capaz de formar un anillo de seis miembros mediante la formación de un enlace disulfuro intramolecular . A pH 7, tiene un potencial de reducción de -0,33 V. La reducción de los enlaces disulfuro se lleva a cabo mediante dos intercambios sucesivos de tiol-disulfuro (ver más abajo). El intermedio es inestable, ya que el segundo grupo tiol tiende a cerrar el anillo y formar DTT oxidado, con la formación de dos enlaces disulfuro reducidos. El DTT solo exhibe actividad reductora a pH alrededor de 7, ya que solo el tiolato cargado negativamente puede formar el -S- activo , mientras que la forma tiol protonada -SH es inactiva. La constante de acidez del grupo tiol se encuentra entre valores de pH de 9,2 a 10,1.
El ditiotreitol se utiliza para "desproteger" el ADN tiolado. El átomo terminal del ADN tiolado en solución tiende a formar dímeros , especialmente en presencia de oxígeno . La dimerización reduce en gran medida la eficiencia de las reacciones de acoplamiento posteriores, como en el caso de la inmovilización de ADN en oro en biosensores . Por lo general, el DTT se mezcla con una solución de ADN y se deja reaccionar, luego el DTT se elimina por filtración o cromatografía . La eliminación de DTT se denomina desalinización.
El ditiotreitol en bioquímica se usa a menudo para restaurar los enlaces disulfuro en las moléculas de proteínas, y especialmente los enlaces intramoleculares e intermoleculares entre los residuos de cisteína . Sin embargo, el DTT no puede reducir los enlaces disulfuro que se encuentran en lo profundo de la estructura de la proteína (que no están en contacto con un solvente), por lo que la reducción de los enlaces SS a menudo se lleva a cabo en condiciones desnaturalizantes (por ejemplo, por calentamiento o en presencia de un fuerte agente desnaturalizante clorhidrato de guanidina 6 M, urea 8 M o dodecilsulfato de sodio al 1 % ). Y, en consecuencia, la presencia de enlaces disulfuro en la superficie de la proteína puede investigarse mediante su reducción en presencia de DTT.
El DTT también se utiliza como agente oxidante. La ventaja de DTT es que no forma enlaces disulfuro mixtos, que es diferente del glutatión . En casos muy raros, el DTT puede formar aductos, por ejemplo, dos átomos de azufre pueden formar enlaces disulfuro con otros átomos de azufre; en tales casos, la TDT no puede ciclar.
El DTT se oxida fácilmente con el oxígeno atmosférico y, por lo tanto, es un compuesto químico relativamente inestable. Dado que los átomos de azufre protonados son menos nucleofílicos , el DTT es un agente reductor más débil a pH ácido .