La aloficocianina (del griego : ἄλλος (allos) - "otro", φύκος (phycos) - "algas" y κυανός (kyanos) - "azul") es una proteína captadora de luz de la familia de las ficobiliproteínas , que también incluye ficocianina , ficoeritrina y ficoeritrocianina , y es un pigmento auxiliar para la clorofila . Todas las ficobiliproteínas son solubles en agua y, por lo tanto, no pueden anclarse a la membrana como los carotenoides , sino que forman grupos anclados a la membrana llamados ficobilisomas . La aloficocianina absorbe y emite luz roja (650 y 660 nm, respectivamente), y se detecta fácilmente en cianobacterias y algas rojas . La capacidad de las ficobilinas para emitir luz se utiliza en kits de inmunoensayo. La aloficocianina se usa a menudo en citometría de flujo , conteo y clasificación de células y microscopía . Para hacer esto, se le introduce reticulación química.
La aloficocianina se puede aislar de diferentes tipos de algas rojas o azul verdosas, cada una de las cuales sintetiza su propia forma ligeramente diferente de esta molécula. La proteína consta de dos tipos de subunidades (α y β), cada una de las cuales lleva un grupo cromóforo de ficocianobilina . La fórmula general de una proteína se puede describir como (αβ) 3 . El peso molecular de la aloficocianina es de 105 kDa.
| Absorción máxima | 652nm |
| Máximo de absorción adicional | 625nm |
| Máximo de radiación | 657,5nm |
| turno de Stokes | 5,5nm |
| Coeficiente de extinción | 2,4 x 105 M −1 cm −1 |
| salida cuántica | 0,68 |
| Brillo | 1,6 x 10 5 M −1 cm −1 |
Aloficocianina reticulada
Como se mencionó anteriormente, para usar aloficocianina en un inmunoensayo, debe entrecruzarse químicamente para evitar la disociación de sus subunidades, lo que ocurre con bastante frecuencia en los tampones fisiológicos estándar. [1] El método tradicional para esto es mezclar con 1-etil-3,3-dimetilaminopropilo, un poderoso agente de reticulación. Luego se trata con una solución ocho molar de urea , y luego se deja renaturalizar, pero ya en un tampón fisiológico. Este procedimiento le permite deshacerse de las subunidades no reticuladas. [2] Existen métodos alternativos, cuyo uso le permite guardar la estructura nativa del trímero y obtener un producto final más brillante [3] .