La reacción de Coombs (RR A. Coombs, inmunólogo inglés, nacido en 1921) es una prueba de antiglobulina (realizada sobre la base de una preparación especialmente preparada: suero de antiglobulina) para determinar anticuerpos antieritrocitos incompletos . La prueba de Coombs se utiliza para detectar anticuerpos contra el factor Rh en mujeres embarazadas y para determinar anemia hemolítica en recién nacidos con incompatibilidad Rh , que conduce a la destrucción de glóbulos rojos ; establecer un estado de isosensibilización, es decir, detectar isoanticuerpos que se producen durante transfusiones de sangre repetidas ; realizar una prueba de compatibilidad para hemotransfusiones; definiciones en eritrocitos de una variedad del factor Rh; detección de anticuerpos autoinmunes en eritrocitos de pacientes con anemia hemolítica adquirida y otras enfermedades autoalérgicas, así como en algunas infecciones que cursan con un componente alérgico ; también se utiliza en la investigación forense y antropológica [1] . Los fundamentos del método fueron descritos en 1908 por Moreshi (S. Moreschi), en 1945 por Coombs , Muran y Race [2] . La reacción tiene lugar en 2 etapas.
La prueba de Coombs directa es una prueba cualitativa de anticuerpos antieritrocitos o componentes del complemento fijados en la superficie de los glóbulos rojos en la sangre de pacientes con anemia hemolítica autoinmune.
La prueba de antiglobulina (prueba de Coombs directa) detecta anticuerpos anti-D, anti-C, anti-E, anti-c y anti-e contra antígenos eritrocitarios.
Al realizar un estudio, se supone que los glóbulos rojos tienen en su superficie, es decir, en forma fija, inmunoglobulinas (anticuerpos) o componentes del complemento. La prueba de Coombs directa revela este hecho mediante la adición de antiglobulina o suero anticomplementario, lo que provoca la unión de los antígenos corpusculares por las inmunoglobulinas, es decir, la aglutinación .
La reacción de Coombs indirecta procede en 2 pasos. Primero, es necesario llevar a cabo artificialmente la sensibilización de los glóbulos rojos. Para ello se incuban los eritrocitos y el suero sanguíneo objeto de estudio, lo que provoca la fijación de anticuerpos en la superficie de los eritrocitos. Después de eso, se lleva a cabo la segunda etapa de la prueba de Coombs: la adición de suero antiglobulina.
El reactivo de Coombs (también conocido como antiglobulina de Coombs o globulina antihumana ) se usa tanto en la prueba de Coombs directa como en la prueba de Coombs indirecta. El reactivo de Coombs es una globulina antihumana. Se produce mediante la inyección de globulina humana en animales que producen anticuerpos policlonales específicos para inmunoglobulinas humanas y factores del complemento humano. Se pueden utilizar reactivos de Coombs más específicos o anticuerpos monoclonales .
Tanto los anticuerpos IgM como los IgG se unen fuertemente a sus antígenos complementarios. Los anticuerpos IgG son más reactivos a 37°C. Los anticuerpos IgM son fácilmente detectables en solución salina a temperatura ambiente porque los anticuerpos IgM pueden establecer un puente entre los glóbulos rojos debido a su gran tamaño, causando efectivamente lo que se considera aglutinación. Los anticuerpos IgG son más pequeños y requieren asistencia para formar un puente lo suficientemente bueno como para formar una reacción de aglutinación visual . Los reactivos utilizados para mejorar la detección de IgG se denominan potenciadores. Los glóbulos rojos tienen una carga neta negativa, llamada potencial zeta, que hace que se repelan entre sí de forma natural. Los potenciadores reducen el potencial zeta de las membranas de los eritrocitos. Los potenciadores comunes incluyen solución de baja fuerza iónica (LISS), albúmina , polietilenglicol (PEG) y enzimas proteolíticas.
En el libro de Arthur Hailey de 1959 El diagnóstico final, la esposa de un empleado del hospital está embarazada; Ella es Rh negativo y él Rh positivo. Menciona esto y recomienda una prueba de Coombs indirecta al asistente del nuevo patólogo, quien piensa que es obvio, e incluso firma el formulario de solicitud de pedido de suero de Coombs. Debido a la extrema tacañería por parte del patólogo jefe, revierte la decisión de otro médico de ordenar el suero de Coombs y se niega a realizar una prueba de Coombs indirecta, en lugar de decidir que las pruebas de proteína y solución salina por sí solas son suficientes. Esta decisión tiene consecuencias trágicas. La adaptación cinematográfica de 1961 de The Young Doctors cuenta la historia, pero con un final feliz.