Amplificación de recombinasa polimerasa

La amplificación de polimerasa de recombinasa ( inglés  Recombinase Polymerase Amplification , RPA) es una alternativa a la reacción en cadena de la polimerasa . La tecnología RPA asegura la multiplicación del material genético en menos de 15 minutos [1] , y la propia reacción se lleva a cabo en condiciones isotérmicas . Al agregar transcriptasa inversa a la mezcla de reacción por medio de RPA, es posible detectar tanto ARN como ADN sin necesidad de un procedimiento de preparación de ADNc por separado . Dado que la reacción es isotérmica, se pueden utilizar equipos más baratos y sencillos, en comparación con la PCR [2][3] [4] [5] [6] [7] . El rango de temperatura óptimo es de 37 a 42 °C, pero la reacción se desarrolla a baja velocidad ya temperatura ambiente. Esta ventaja convierte a la RPA en una excelente candidata para el desarrollo de pruebas de diagnóstico molecular económicas, rápidas y basadas en el campo. La técnica RPA fue desarrollada por TwistDX LTD, una empresa de biotecnología con sede en Cambridge, Reino Unido.

Notas

  1. ↑ PRUEBA RÁPIDA DETECTARÁ ADN DE VIRUS SIN PCR . chemport.ru (02/04/2015). Consultado el 6 de octubre de 2015. Archivado desde el original el 6 de octubre de 2015.
  2. ↑ Zachary Austin Crannell, Brittany Rohrman, Rebecca Richards-Kortum. Cuantificación del ADN del VIH-1 mediante amplificación de polimerasa de recombinasa en tiempo real  // Química analítica. — 2014-06-17. - T. 86 , n. 12 _ - S. 5615-5619 . — ISSN 0003-2700 . -doi : 10.1021/ ac5011298 .
  3. ↑ Liu, L., Wang, J., Geng, Y., Wang, J., Li, R., Shi, R. y Yuan, W. (2018). Ensayo de amplificación de polimerasa de recombinasa sin equipo que usa calor corporal para la detección visual y rápida en el punto de necesidad del parvovirus canino 2. Sondas moleculares y celulares, 39, 41-46. PMID 29705183 PMC 7127419 doi : 10.1016/j.mcp.2018.04.004
  4. ↑ Qin, Z., Xue, L., Cai, W., Gao, J., Jiang, Y., Yang, J., ... & Wu, Q. (2021). Desarrollo de un ensayo de amplificación asistido por recombinasa para la detección rápida del norovirus humano GII. 4. Enfermedades infecciosas BMC, 21(1), 1-8. PMID 33750333 PMC 7941963 doi : 10.1186/s12879-021-05942-x
  5. ↑ Zhang, W., Feng, Y., Zhao, H., Yan, C., Feng, J., Gan, L., ... & Yuan, J. (2021). Un ensayo de amplificación asistido por recombinasa para la detección rápida del gen de carbapenemasa de Klebsiella pneumoniae y sus características en Klebsiella pneumoniae. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology, 869. PMID 34616692 PMC 8488121 doi : 10.3389/fcimb.2021.746325
  6. ↑ Feng, Y., Xue, G., Feng, J., Yan, C., Cui, J., Gan, L., ... & Yuan, J. (2021). Detección rápida del gen de metalo-β-lactamasa de Nueva Delhi mediante amplificación asistida por recombinasa directamente en muestras clínicas de niños. Fronteras en microbiología, 2087. PMID 34367092 PMC 8339468 doi : 10.3389/fmicb.2021.691289
  7. ↑ Li, F., He, P., Xiong, D., Lou, Y., Pu, Q., Zhang, H., ... y Yu, J. (2021). Un método de amplificación asistido por recombinasa de transcripción inversa para la detección rápida y en el punto de atención del SARS-CoV-2, incluidas las variantes. Virus, 13(9), 1875. PMID 34578456 PMC 8472806 doi : 10.3390/v13091875