Prueba de vicia

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Prueba de Vicia (prueba de Vicia) - sistema beta vegetal[ término desconocido ] que se utiliza en estudios genotoxicológicos de diversos factores. Es una de las 9 principales pruebas genéticas de plantas recomendadas por el Programa Internacional Gene-Tox y la Organización Mundial de la Salud. En este ensayo, el objeto de estudio son las células de los meristemos de la raíz de Vicia faba L. ( frijol ). Actualmente es una de las pruebas genéticas más utilizadas en el mundo [1] [2] [3] .

Características del método

Aplicación

Desde mediados del siglo XX, las células del meristemo de la raíz de Vicia faba se han vuelto populares entre genetistas y morfólogos como un modelo citogenético conveniente. Esto se debe a una serie de características del genoma de Vicia faba :

  1. pequeño tamaño de los cromosomas
  2. pequeño número de cromosomas
  3. alto grado de condensación de la cromatina, lo que permite observar claramente todas las fases de la mitosis

La prueba Vicia se usa con mayor frecuencia para monitorear la actividad mutagénica del agua y el suelo de origen natural y antropogénico. La prueba también se utiliza en el estudio de la seguridad genética de aditivos alimentarios, pesticidas, nanopartículas, radiación y muchos otros factores [1] .

Especificidad

A la hora de estudiar el efecto mutagénico de varios factores en el test de Vicia , se utilizan dos análisis genéticos estándar y universales: análisis de antelofase de aberraciones cromosómicas y test de micronúcleos (que es el más común). Además, la dinámica de la actividad mitótica se puede estudiar en los meristemos de Vicia faba [2] [1] .

Configuración del experimento

Para los experimentos, se utilizan muestras de frijoles del mismo cultivo. Las semillas se germinan durante 5 días a temperatura ambiente en cajas Petri con papel filtro o algodón humedecido con agua destilada. Cuando las raíces alcancen los 5 mm, retire la punta para estimular el crecimiento de raíces secundarias. Al final del experimento, solo se seleccionan las tres plántulas más grandes y se mide la longitud de las tres raíces secundarias más largas para cada una. Luego se cortan las raíces y se fijan con fijador de Clark (1 parte de ácido acético glacial: 3 partes de etanol al 96% (100%)). Los meristemos se tiñen con acetoorceína al 1% (se puede hacer una maceración con HCl 1 M a 600ºC durante 6 minutos antes de la tinción).Se preparan preparaciones prensadas. Para establecer la frecuencia de micronúcleos, se examinan 1000 interfases en cada preparación. En total, se preparan 6 preparaciones para cada grupo. Para evaluar la actividad mitótica en la preparación, se analizan 1000 células en división en todas las fases de la mitosis [1] .

Estadísticas

Se utiliza la prueba no paramétrica de Mann-Whitney, seguida de la prueba de Kruskal-Wallis.

Véase también

Notas

  1. 1 2 3 4 Anne-Sophie Foltête, Adrien Dhyèvre, Jean-François Ferard, Sylvie Cotelle. Mejora de la prueba de Vicia-micronúcleo para la evaluación de la calidad del suelo: una propuesta para la estandarización internacional: artículo. - Quimiosfera, 2011. - S. 1624-1629 .
  2. 1 2 Ma TH Vicia pruebas citogenéticas para mutágenos ambientales. Un informe del Programa Gene-Tox de la Agencia de Protección Ambiental de EE. UU. - Mutation research, 1982. - S. 257-271 .
  3. OMS. Directrices para pruebas a corto plazo para la detección de sustancias químicas mutagénicas y cancerígenas: Artículo. - Ginebra: OMS, 1989. - S. 189 .