El espermograma (del otro griego σπέρμα - semilla y γράμμα - registro) es un análisis de la eyaculación (espermatozoide) utilizado en medicina para determinar la fertilidad de un hombre e identificar posibles enfermedades del sistema reproductivo. Se prescribe un espermograma para las quejas de una pareja casada sobre la infertilidad , un espermograma también está indicado para los donantes de esperma y las personas que planean la crioconservación de esperma .
El componente principal del espermograma es el análisis microscópico de la eyaculación, en el que se determinan las características de los elementos celulares de los espermatozoides, a saber: el número de espermatozoides, la motilidad de los espermatozoides, las características morfológicas de los espermatozoides, el número y tipos de leucocitos, el número y tipos de células inmaduras de espermatogénesis, etc. Además, parámetros macroscópicos del eyaculado: volumen seminal, color, tiempo de licuefacción y viscosidad del eyaculado, pH. A veces, se lleva a cabo un análisis bioquímico adicional de la eyaculación, en el que se examina con mayor frecuencia el contenido de fructosa , zinc , alfa-glucosidasa , L-carnitina en el semen .
Las ideas sobre qué características tiene el eyaculado de un hombre fértil han cambiado con el tiempo. Con el aumento en la calidad y cantidad de estudios en la sección de infertilidad masculina, los datos sobre la espermatogénesis se están revisando y refinando. Las propuestas de diferentes autores sobre las normas de volumen de eyaculación, concentración y motilidad de los espermatozoides se presentan en la tabla.
| Autor | Año | Volumen, mililitros | Concentración, mln/ml | Movilidad, % |
|---|---|---|---|---|
| Davis | 1943 | cuatro | 60 | 80 |
| Sharren | 1972 | 2 | 40 | 70 |
| Eliasson | 1981 | 2 | veinte | cincuenta |
| Bustos-Obregón | 1981 | 1.5 | veinte | 40 |
| Van Zyl | 1976 | 2 | diez | treinta |
| Normas de la OMS | 1999 | 2 | veinte | cincuenta |
| Normas de la OMS | 2010 | 1.5 | Dieciocho | 32 |
En la URSS y actualmente en Rusia no existen documentos especiales del Ministerio de Salud que establezcan las normas para la eyaculación fértil. Las instituciones médicas tienen derecho a evaluar la fertilidad del eyaculado según sus propios estándares. Los estándares propuestos por la Organización Mundial de la Salud (OMS) son muy populares entre los médicos . La prevalencia de los estándares de la OMS es tan grande entre los médicos que estos estándares pueden considerarse generalmente reconocidos en la actualidad, y el libro "Directrices de la OMS para el estudio de laboratorio de la eyaculación humana y la interacción de los espermatozoides con el moco cervical" es la publicación más autorizada. sobre las reglas para la realización de espermogramas.
La última edición de las Directrices de la OMS para las pruebas de laboratorio de la eyaculación humana y la interacción de los espermatozoides con el moco cervical (Cambridge University Press, 1999) propone los siguientes indicadores normativos de la eyaculación fértil:
| Índice | Sentido |
|---|---|
| Volumen | 2 ml o más |
| pH | 7.2 o más |
| Concentración de esperma | 20 millones/ml o más |
| Recuento total de espermatozoides | 40 millones o más |
| motilidad de los espermatozoides | 50% o más de movimiento (Categoría A+B) o 25% o más progresivo (Categoría A) dentro de los 60 minutos posteriores a la eyaculación |
| viabilidad de los espermatozoides | 50% o más vivo |
| Concentración de leucocitos | menos de 1 millón/ml |
| Anticuerpos antiespermatozoides | menos del 50% de los espermatozoides asociados a ACAT detectados por MAR o ImunnoBeat |
La OMS no da recomendaciones específicas con respecto a la norma para el número de espermatozoides con morfología normal, señalando el hecho de que aún se están realizando estudios de valores normativos para los espermatozoides.
En 2010, la OMS realizó nuevos cambios en los valores de referencia de los indicadores de eyaculación, cambiando el método de su procesamiento e investigación. En la quinta edición más reciente del "Manual de laboratorio de la OMS para el examen y procesamiento del semen humano", se modificaron las normas sobre el número y la motilidad de los espermatozoides, el número de formas normales de espermatozoides. Así, por ejemplo, se ha abolido la clasificación de los espermatozoides móviles: según los grupos a, b, c, d. En cambio, se propone una clasificación de espermatozoides con movimiento progresivo, movimiento no progresivo e inmóviles.
A continuación se presentan las normas de los indicadores de eyaculación, según las últimas recomendaciones de la OMS de 2010:
| Índice | Sentido |
|---|---|
| Volumen de eyaculado, ml | 1,5 ml o más |
| Número total de espermatozoides, millones | 39 y más |
| Concentración de esperma, millones en 1 ml | 15 o más |
| Motilidad espermática total, % | 40 o más |
| Espermatozoides con movimiento progresivo, % | 32 o más |
| Viabilidad, % | 58 y más |
| Morfología: formas normales, % | 4 o más |
El eyaculado correspondiente a los valores normativos aceptados se denomina normal y el estado de este eyaculado se designa con el término "normospermia" o "normozoospermia".
La OMS sugiere los siguientes términos para describir las condiciones patológicas de la eyaculación:
Los términos "oligozoospermia", "asthenozoospermia" y "teratozoospermia" en presencia de anormalidades apropiadas en la eyaculación se pueden combinar en una sola palabra, por ejemplo: "oligoasthenoteratozoospermia", "asthenoteratozoospermia", etc.
Además, los siguientes términos son comunes:
A veces se pueden encontrar los siguientes términos:
Antes de donar esperma para su análisis, se recomienda a los hombres que se abstengan de la actividad sexual y la masturbación durante 2 a 7 días. Este período se recomienda para estandarizar las condiciones del análisis, para que pueda comparar los resultados obtenidos en diferentes laboratorios . También suele recomendarse evitar el consumo excesivo de bebidas alcohólicas fuertes durante 2-5 días (aunque no se ha demostrado el efecto del alcohol sobre la calidad del esperma durante este periodo). Asimismo, durante varios días antes del análisis, se deben evitar las visitas a saunas , baños de vapor , baños termales y otras salas con temperaturas muy altas, ya que las altas temperaturas reducen la motilidad de los espermatozoides.
La forma más común de obtener semen para análisis es por medio de la masturbación ; este método es recomendado por la OMS. Otros métodos tienen desventajas. Dichos métodos incluyen: coitus interruptus y el uso de un condón médico especial sin lubricación. El eyaculado se recibe en un plato ofrecido por la institución médica correspondiente. Como regla general, se utilizan vasos estériles especiales para recolectar secreciones biológicas líquidas ( orina , heces ). Es posible obtener un eyaculado fuera de un centro médico con transporte posterior.
El esperma normal inmediatamente después de la eyaculación es un coágulo , o simplemente un líquido viscoso. Con el tiempo, el semen se vuelve líquido. Este período de tiempo se denomina "tiempo de licuefacción". Por lo general, la eyaculación se licua en 15 a 60 minutos. Si la eyaculación no se licua en 1 hora, entonces, por regla general, ya no se licua en absoluto.
La licuefacción de la eyaculación está determinada por la llamada "longitud del hilo". El eyaculado se toca con una varilla de vidrio o plástico (pipeta) y la varilla se eleva por encima de la superficie del eyaculado; Para determinar la "longitud del hilo" en la medicina moderna, a menudo usan la liberación de eyaculación de una pipeta serológica de 5 ml. La "longitud del hilo" caracteriza el parámetro "viscosidad". La viscosidad y el tiempo de adelgazamiento son parámetros relacionados.
La viscosidad se imparte al semen por la glicoproteína semenogelina, que se produce en las vesículas seminales . Las funciones de la semenogelina no se conocen por completo, se supone que se une a ligandos en la superficie de los espermatozoides y los mantiene en un estado inactivo. Durante la eyaculación , el jugo prostático , que contiene el llamado " antígeno prostático específico ", se mezcla con los espermatozoides y el jugo de las vesículas seminales . Esta enzima proteolítica degrada la semenogelina, lo que provoca la licuefacción del semen y, presumiblemente, hace que los espermatozoides se activen (junto con otros factores). La no licuefacción de la eyaculación indica disfunción prostática.
Dado que el aumento de la viscosidad del eyaculado puede afectar la confiabilidad del análisis microscópico, el eyaculado que no se haya licuado en 1 hora debe licuarse artificialmente usando enzimas proteolíticas (por ejemplo, la tripsina de la farmacopea ).
El volumen del eyaculado se suele medir con una pipeta serológica graduada (al mismo tiempo que se determina la viscosidad). En la mayoría de los laboratorios, un volumen de eyaculado de menos de 2 ml se considera anormal, el estado de dicho eyaculado se caracteriza como "oligospermia". El volumen principal de la eyaculación está dado por el jugo de las vesículas seminales (alrededor de dos tercios del volumen) y el jugo de la glándula prostática (alrededor de un tercio del volumen). La insuficiencia del volumen del eyaculado puede ser causada por eyaculación retrógrada, disfunción, hipoplasia de vesículas seminales, disfunción prostática, hipogonadismo, obstrucción (total o parcial) de los conductos eyaculadores, un breve período de abstinencia de actividad sexual antes de donar semen para análisis.
La acidez del eyaculado se determina después de la dilución utilizando papel indicador o un medidor de pH . La OMS recomienda un valor de pH de al menos 7,2 como indicador normal. La eyaculación de la mayoría de los hombres tiene un pH de 7,8 a 8,0.
El color del eyaculado en la medicina moderna no tiene un valor diagnóstico serio, su fijación en el espermograma en blanco es un tributo a la tradición. Según las ideas tradicionales, una eyaculación normal tiene un color "blanquecino-grisáceo", a veces se caracteriza como "opalescente", "blanco turbio". Una eyaculación clara puede (pero no necesariamente) indicar un recuento bajo de espermatozoides en la eyaculación. La eyaculación amarillenta o rosada a veces se asocia con hemospermia. Cabe señalar que el análisis microscópico determina con precisión la cantidad de espermatozoides y glóbulos rojos en el semen, por lo que no es necesario fijar el color de la eyaculación.
Algunos laboratorios corrigen el olor a eyaculado. Se caracteriza como "específico" (en algunos libros médicos obsoletos (por ejemplo, en el "Manual de la OMS...", 1991) se compara con el olor de las flores de castaño). El olor de la eyaculación proviene de la sustancia espermina secretada por la próstata. Las funciones de la espermina son desconocidas. Algunos andrólogos usan el olor de la eyaculación para juzgar la actividad secretora de la glándula prostática, pero se desconoce el valor diagnóstico de este enfoque.
El número de espermatozoides se expresa en términos relativos ( concentración o cantidad en 1 ml de eyaculado) y en términos absolutos (cantidad total en el eyaculado ). Como regla general, las cámaras de conteo se utilizan para determinar la cantidad de espermatozoides, dispositivos que le permiten observar los espermatozoides en un cierto volumen de líquido bajo un microscopio (esto le permite determinar la cantidad de espermatozoides en 1 ml, es decir, la concentración , por operaciones aritméticas). Para contar los espermatozoides, se utilizan cámaras de recuento de células sanguíneas : hemacitómeros (" cámara de Goryaev ", cámara de "Neubauer") o cámaras de recuento especiales para espermatozoides ("cámara de Makler", etc.). También existen métodos de concentración rápida , como el recuento de espermatozoides en un portaobjetos de vidrio. Si se cubre una gota de 10 µl de esperma con un cubreobjetos de 22×22, entonces el número de espermatozoides en el campo de visión de un microscopio con un aumento de 400 veces será aproximadamente igual al número de millones de espermatozoides en 1 ml de eyaculado. Existen sistemas computarizados para determinar la concentración de espermatozoides, los llamados analizadores de esperma. Tal dispositivo es un microscopio con una cámara de video instalada y un sistema de evaluación de imágenes.
Con todos los métodos para determinar el número de espermatozoides, primero se obtienen los datos de concentración. Luego, al multiplicar la concentración por el volumen, se obtienen datos sobre el número total de espermatozoides en el eyaculado. Según la OMS, un eyaculado normal tiene al menos 20 millones de espermatozoides por 1 ml de volumen, o al menos 40 millones en volumen total. La condición del eyaculado con menos espermatozoides se caracteriza como "oligozoospermia".
A veces, el número de espermatozoides es tan pequeño que no se puede expresar en una determinada concentración (por ejemplo, el médico vio solo unos pocos espermatozoides después de examinar más de una muestra de eyaculado). En este caso, se habla de "espermatozoides únicos en el campo de visión", "espermatozoides únicos en la preparación" o "espermatozoides únicos en el eyaculado". A veces, los espermatozoides solo pueden detectarse centrifugando el semen y examinando el sedimento con un microscopio.
Según la motilidad, los espermatozoides se dividen en 4 categorías: A, B, C y D:
| Categoría | Nombre | Característica de movimiento |
|---|---|---|
| Categoría A | Progresivamente activo | Muévete en línea recta a una velocidad de al menos 25 micras/s (en dos segundos recorren una distancia igual a su longitud) |
| Categoría B | Movimiento progresivamente lento | Muévase en línea recta a una velocidad de menos de 25 µm/s |
| Categoría C | Mobiliario no progresivo | Se mueven indirectamente o simplemente se mueven en su lugar. |
| Categoría D | inmóvil | inmóvil |
Se cree que los espermatozoides de categoría A y B pueden llegar al óvulo (los espermatozoides de categoría B a veces pueden aumentar su velocidad después de la capacitación en la vagina y el cuello uterino). La proporción de espermatozoides de diferentes categorías de motilidad se determina en un portaobjetos de vidrio "a ojo", o en una cámara de recuento, o utilizando un analizador de esperma computarizado.
Según la propuesta de la OMS, la eyaculación se considera normal si se cumple al menos una de dos condiciones: 1) si la proporción de espermatozoides de categoría de movilidad A no es inferior al 25%, 2) o si la proporción de espermatozoides de categoría de movilidad A y B en la suma no es inferior al 50%. El estado del eyaculado que no cumple estas condiciones se caracteriza como “astenozoospermia”.
El análisis de la normalidad morfológica de los espermatozoides, o simplemente "morfología de los espermatozoides", se realiza mediante un microscopio. El médico de laboratorio determina la proporción de espermatozoides cuya apariencia corresponde a la norma y la proporción de espermatozoides con morfología anormal. Para el análisis, se usa esperma nativo o se prepara un frotis de esperma teñido en vidrio. El frotis se tiñe con tintes histológicos, en el caso más simple con hematoxilina , en casos más complejos, la tinción compleja se realiza según los métodos de Schorr, Papanicolaou o Romanovsky-Giemsa .
El semen siempre contiene una gran cantidad de espermatozoides anormales. La morfología anormal puede relacionarse con la estructura de la cabeza (forma, tamaño anormal, ausencia o acrosoma reducido ), la estructura del cuello y la parte media (curvatura, tamaño anormal), flagelo (curvatura, ausencia o múltiples flagelos, tamaño). La OMS no da recomendaciones inequívocas sobre qué porcentaje de espermatozoides anormales es aceptable en el semen normal. En la edición de 1992 de las "Guías...", se hizo énfasis en la recomendación de estudiar la morfología en el eyaculado nativo utilizando ópticas de "campo claro"; con este método, la proporción de espermatozoides anormales no debe exceder el 50% en un eyaculado normal. La edición de 1999 de las Directrices de la OMS enfatizó la recomendación de examinar la morfología en el eyaculado nativo utilizando ópticas de "contraste de fase"; con este método, la proporción de espermatozoides anormales no debe exceder el 70% en un eyaculado normal. Pero la misma publicación también recomienda utilizar los llamados "criterios estrictos de Kruger" para examinar la morfología en un frotis de esperma teñido. De acuerdo con estos criterios (aplicables solo para el frotis), la proporción de espermatozoides anormales no debe exceder el 85%. Así, el establecimiento de normas para el número de espermatozoides anormales depende del método para evaluar la morfología de los espermatozoides. El método más preciso es el estudio de un frotis teñido. El estado de la eyaculación, que no cumple con los estándares para la morfología de los espermatozoides, se caracteriza como "teratozoospermia".
La viabilidad de los espermatozoides se caracteriza por la proporción de espermatozoides vivos. El esperma móvil siempre está vivo. Un espermatozoide inmóvil puede estar vivo, pero con funciones de movimiento deterioradas, o muerto. La OMS propone como estándar de viabilidad - al menos el 50% de la vida del total. Por lo tanto, si la proporción de espermatozoides móviles (categorías A, B, C) es del 50% o más, entonces no es necesario realizar un estudio de viabilidad especial. Este parámetro tiene sentido para investigar con astenozoospermia. Los dos métodos más comunes para evaluar la viabilidad de los espermatozoides. Ambos métodos se basan en el hecho de la violación de la integridad de la membrana externa de la célula poco después de su muerte:
Las células redondeadas o redondas se denominan elementos celulares no flagelados de los espermatozoides. En otras palabras, las células redondeadas son todo lo que no son espermatozoides. Este concepto colectivo incluye dos grupos de células de diferente origen: los leucocitos y las denominadas "células inmaduras de la espermatogénesis". El concepto de "células redondeadas" apareció porque es imposible distinguir los leucocitos de las células de espermatogénesis inmaduras en el eyaculado nativo usando microscopía óptica. Las células que son atípicas para el eyaculado (eritrocitos, células epiteliales de los conductos deferentes, etc.) no se clasifican como "células redondas".
El significado diagnóstico del parámetro "número de celdas redondeadas" no está claro. En el pasado, la OMS propuso una norma de no más de 5 millones/ml, justificándola por el hecho de que si el número de células redondeadas supera los 5 millones/ml, es probable que el contenido de leucocitos supere la norma (no más de 1 millón/ml). Posteriormente, se canceló la norma "no más de 5 millones/ml".
Las células inmaduras de la espermatogénesis se denominan células de la serie espermatogénica, es decir, precursoras de los espermatozoides. Estos incluyen espermatogonias, espermatocitos de primer y segundo orden y espermátidas (ver espermatogénesis ). El eyaculado siempre contiene células de espermatogénesis inmaduras, su número varía mucho (generalmente 2-5 millones/ml, pero puede alcanzar varias decenas de millones en 1 ml). Aparentemente, el número de células de espermatogénesis inmaduras no tiene valor diagnóstico.
Según un punto de vista común, un contenido elevado de leucocitos en el semen puede indicar la presencia de procesos inflamatorios en las glándulas sexuales accesorias (próstata, vesículas seminales). Según la OMS, un eyaculado normal no tiene más de 1 millón de leucocitos por 1 ml. La condición del eyaculado con una gran cantidad de leucocitos se caracteriza como "leucocitospermia".
La gran mayoría de los leucocitos en el semen están representados por granulocitos segmentados neutrofílicos . Los tipos restantes de leucocitos en el eyaculado normal son raros, por lo que los métodos para detectar leucocitos están dirigidos a identificar granulocitos segmentados. En el eyaculado nativo no teñido, es imposible distinguir de forma fiable los granulocitos de las células de espermatogénesis inmaduras. El método más simple para detectar granulocitos es la microscopía de un frotis de esperma teñido. Basta con tratar el frotis de esperma con cualquier colorante que tiña el núcleo, por ejemplo, la hematoxilina . Las células redondas con núcleos segmentados se definen como granulocitos. También existen métodos para teñir granulocitos utilizando la llamada "prueba de peroxidasa": se agrega un sustrato incoloro al esperma, que se escinde con peroxidasa en un producto coloreado. Los granulocitos contienen peroxidasa , descomponen el sustrato y se tiñen de amarillo.
La detección de leucocitos también es importante para diagnosticar las causas de la azoospermia . La azoospermia obstructiva se debe a la obstrucción de los conductos deferentes, la azoospermia secretora se debe a la supresión de la espermatogénesis. Con la azoospermia secretora, las células de espermatogénesis inmaduras suelen estar presentes en el eyaculado, con la azoospermia obstructiva, las células de espermatogénesis inmaduras están ausentes (debido a la obstrucción del tracto genital). Si con azoospermia todas las células redondas del eyaculado se determinan como leucocitos, entonces la probabilidad de azoospermia obstructiva es alta.
Anticuerpos antiespermatozoides [1] (ASAT) se denominan anticuerpos contra los antígenos de los espermatozoides. Dichos anticuerpos pueden ser producidos tanto por el cuerpo de un hombre como por el cuerpo de una mujer. El motivo de la aparición es el contacto del sistema inmunitario con los espermatozoides en enfermedades de los órganos genitales. Los anticuerpos antiespermatozoides pueden causar infertilidad de naturaleza inmune. Al unirse a antígenos en la cabeza del espermatozoide, los anticuerpos antiespermatozoides pueden bloquear los receptores de unión del espermatozoide y el óvulo (el espermatozoide no puede adherirse a la membrana del óvulo para iniciar la reacción acrosomal). Al unirse a antígenos en la cola de los espermatozoides, ASAT puede interferir con el movimiento de los espermatozoides. ACAT causa una mayor fragmentación del ADN, la patogénesis de la patospermia en la infertilidad inmune se asocia con el estrés oxidativo.
Un signo común de la presencia de ASAT en el semen es la llamada "espermaglutinación": pegado específico de espermatozoides, pegado de espermatozoides entre sí. La espermaglutinación debe distinguirse de la llamada "agregación de espermatozoides": aglutinación no específica debida a la presencia de moco en el semen. La agregación de espermatozoides es una variante de la norma y no tiene importancia clínica. Durante la espermaglutinación, los espermatozoides móviles forman pequeños grupos de unión (varios espermatozoides se unen con las mismas partes de su célula) "cabeza con cabeza" o "cola con cola" o "cuello con cuello". Estos grupos de unión a veces se denominan "rosetas". Como regla general, el número de rosetas es pequeño, uno para varios campos de visión del microscopio, pero también puede ser enorme. Las células redondeadas no participan en la aglutinación y no se incluyen en las "rosetas". Durante la agregación, los espermatozoides forman grandes grupos (de decenas a cientos). Dichos grupos a menudo forman una forma de "hebra" e incluyen celdas redondeadas.
Existen métodos inmunoquímicos para determinar ASAT. El más común en la práctica de laboratorio moderna es el método MAR (reacción mixta de antiglobulina). En este método, se agrega una gota de una suspensión de micropartículas de silicona unidas a anticuerpos de conejo contra anticuerpos humanos a una gota de esperma en un portaobjetos de vidrio. Tales partículas se unen a los anticuerpos humanos. Si ASAT está presente en el semen, entonces las partículas se adhieren a los espermatozoides. En este caso, los espermatozoides con micropartículas adheridas se observan en el campo de visión del microscopio. Si el número de espermatozoides portadores de micropartículas supera el 50%, se llega a una conclusión sobre la presencia de "anticuerpos antiespermatozoides" en el semen.