El medio LB ( eng. Caldo de lisogenia ) es un medio rico para el crecimiento de cultivos bacterianos. La abreviatura LB a menudo se malinterpreta como caldo Luria , caldo Lennox o miércoles Luria-Bertani . Según el autor de la receta del miércoles, Giuseppe Bertani , la abreviatura LB significa inglés. caldo de lisogenia - medio lisogénico. [1] La composición del medio LB se publicó por primera vez en 1951 en el artículo de Bertani sobre lisogenia. Este artículo describe el aislamiento de fagos Enterobacteriaceae P1, P2 y P3 en su propio medio para el crecimiento óptimo de Shigella y la formación de placas de fagos. [1] [2]
El medio LB se ha convertido en el estándar para cultivar Escherichia coli desde la década de 1950. [3] [4] [5] [6] [7] El medio LB se usa ampliamente en microbiología molecular para el aislamiento de ADN plasmídico y proteínas recombinantes. El medio sigue siendo el más utilizado para cultivar cepas recombinantes de Escherichia coli . [8] El uso del entorno LB para la investigación en el campo de la fisiología es limitado. [9]
Se han descrito varias formulaciones del medio LB. Tienen una composición similar y contienen:
La fuente de péptidos y peptonas es la triptona . El extracto de levadura contiene vitaminas y oligoelementos . Los iones de sodio, esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico, se añaden al medio en forma de cloruro de sodio . La triptona es también una fuente de aminoácidos esenciales .
En el artículo original de 1951, Bertani usó 10 gramos de NaCl y 1 gramo de glucosa por 1 litro de medio; Luria en el ambiente "L caldo" de 1957 copió completamente el ambiente de Bertani. [6] Las siguientes recetas no contienen glucosa.
Las recetas del medio LB difieren en la cantidad de cloruro de sodio agregado, lo que permite crear condiciones para el crecimiento de diferentes cepas de bacterias. Los medios bajos en sal, Lennox LB y Luria LB se utilizan para hacer crecer cultivos con antibióticos sensibles a la sal. [diez]
Método general para preparar 1 litro de medio:
Antes del autoclave, algunos investigadores ajustan el pH del medio a 7,5 u 8 con solución de hidróxido de sodio . Sin embargo, el hidróxido de sodio no tiene propiedades amortiguadoras, por lo que el pH del medio cambia drásticamente cuando las bacterias se multiplican. Para mantener un cierto valor de pH, algunos investigadores ajustan el pH a la solución Tris 5-10 mM requerida a un pH determinado (aunque el uso de un tampón a esta concentración no puede garantizar el mantenimiento de un pH determinado durante el crecimiento bacteriano). En la mayoría de los casos, no se requiere el pH exacto del medio.