Cuerpo de barra

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El cuerpo de Barr (cromatina sexual X) es un cromosoma X inactivo  plegado en una estructura densa ( heterocromática ) , que se observa en los núcleos de interfase de las células somáticas de los mamíferos placentarios femeninos , incluidos los humanos. Se tiñe bien con tintes básicos [1] .

Cualquiera de los dos cromosomas X del genoma se puede inactivar al comienzo del desarrollo embrionario ; la elección se hace al azar. Una excepción en el ratón son las células de las membranas germinales , también formadas a partir del tejido del embrión, en las que sólo se inactiva el cromosoma X paterno [2] .

Así, en una hembra de mamífero que es heterocigota para cualquier rasgo determinado por el gen del cromosoma X, diferentes alelos de este gen funcionan en diferentes células ( mosaicismo ). Un ejemplo visible clásico de tal mosaicismo es la coloración de los gatos carey  : en la mitad de las células, el cromosoma X con el "rojo" está activo, y en la otra mitad, con el alelo "negro" del gen involucrado en la formación de melanina _ Los gatos carey son extremadamente raros y tienen dos cromosomas X ( aneuploidía ) [3] .

En humanos y animales con aneuploidía que tienen 3 o más cromosomas X en el genoma (ver, por ejemplo, el síndrome de Klinefelter ), el número de cuerpos de Barr en el núcleo de una célula somática es uno menos que el número de cromosomas X ( es decir, solo 1 cromosoma X siempre permanece activo, sin importar cuántos haya).

Uso

El análisis de la cromatina sexual se utiliza para:

  1. Análisis por células de un individuo de su sexo, cuando no esté disponible para la investigación (diagnóstico prenatal del sexo del feto, examen médico forense, etc.).
  2. Identificación del sexo si no está claro (p. ej., al determinar el hermafroditismo verdadero o falso).
  3. Comprobación de la correspondencia del fenotipo con el genotipo del organismo (por ejemplo, al examinar mujeres en competiciones deportivas).
  4. Determinación del sexo del feto en el útero, cuando se sospecha de una enfermedad ligada al sexo (p. ej., hemofilia, algunas formas de distrofia muscular, etc.), para prevenir el nacimiento de un niño con una enfermedad terminal.
  5. Se utiliza para el diagnóstico preliminar de desviaciones en el número o estructura de los cromosomas sexuales, cuando el sujeto tiene violaciones del desarrollo sexual.

Avances en la obtención de cromatina sexual para análisis

  1. Obtención de material celular. Fuentes: una variedad de tejidos, pero se prefieren aquellos que no necesitan ser cultivados in vitro (in vitro).
  2. Para determinar la cromatina X en un adulto, se usan con mayor frecuencia frotis de la mucosa bucal , con menos frecuencia de la mucosa vaginal, así como células de folículos pilosos. El diagnóstico perinatal se realiza utilizando células amnióticas.
  3. Para determinar el número de cromatina Y, se utilizan los tejidos anteriores, así como los espermatozoides y los linfocitos cultivados.
  4. En general, los cultivos celulares de una sola capa, generalmente fibroblastos, son ideales para el análisis de cromatina X e Y.
  5. Fijación de preparaciones con una solución de metanol o una mezcla de etanol y ácido acético (3:1) o etanol solo.
  6. Deshidratación por transferencia (ÚNICAMENTE para análisis de cuerpos de Barr) de la droga de una solución a otra con exposición a cada una por 5 minutos: en alcohol 70°, en alcohol 50°, en agua destilada I, en agua destilada II.
  7. Hidrólisis (SOLO para análisis de cuerpos de Barr) en HCl (opcional).
  8. Tinción de cromatina sexual. Los métodos para teñir la cromatina X e Y son diferentes. El primer tipo de cromatina se tiñe con preparaciones a base de colorantes no fluorescentes: fucsina básica, tionina, acetoorceína, azul de toluidina, etc. El segundo tipo se tiñe con fluorocromos, derivados de la naranja de acridina: quinina, mostaza de quinacrina, propilo de quinacrina. Las preparaciones se envejecen en la tintura de 30 minutos a 12 horas.

Las preparaciones de cromatina X se secan y se examinan por inmersión en aceite con luz transmitida. Las preparaciones de cromatina Y se encierran en una solución tampón especial y se estudian con luz ultravioleta utilizando un microscopio luminiscente.

Análisis

El ensayo se lleva a cabo en células desplegadas separadas. Las secciones de tejido para determinar la cromatina sexual se utilizan solo cuando es imposible obtener frotis o preparaciones-huellas de una sección de órgano.

  1. Microscopía.
  2. Interpretación de los resultados [4] .

Fuentes

  1. ↑ Diccionario enciclopédico biológico. M., "Enciclopedia soviética", 1986.
  2. ↑ M. Singer, P. Berg. Genes y genomas. M., "Mir", 1998. T. 2, S. 146.
  3. ↑ Mosaicismo, gatos carey y gatitos genéticamente imposibles . Archivado el 21 de octubre de 2009 en Wayback Machine .
  4. ↑ Gran Enciclopedia Médica / Ed. UN. Bakulev: en 35 volúmenes - M .: Medgiz, 1956. -1964. – 1151 pág.