Electroforesis de proteínas

La electroforesis de proteínas  es un método para separar una mezcla de proteínas en fracciones o proteínas individuales, basado en el movimiento de macromoléculas de proteínas cargadas de varios pesos moleculares en un campo eléctrico estacionario . La electroforesis de proteínas se utiliza tanto para analizar los componentes de una mezcla de proteínas como para obtener una proteína homogénea . La variante más común del análisis electroforético de proteínas es la electroforesis en gel de poliacrilamida de Laemmli [2] [3] .

Variantes del método de electroforesis de proteínas

Hay muchas variedades y modificaciones de este método que se usan (o se usaron en ciertos períodos en el desarrollo de la bioquímica y la biología molecular ) en varios campos [3] :

La electroforesis de proteínas también se subdivide en electroforesis unidimensional y bidimensional (2D) [6] , preparativa y analítica, así como electroforesis de proteínas nativas y electroforesis en presencia de un detergente (en condiciones desnaturalizantes ). Una variación del método de electroforesis es el enfoque isoeléctrico y la isotacoforesis . En el caso de utilizar métodos inmunológicos para detectar proteínas separadas, se habla de inmunoelectroforesis .

Dependiendo del diseño del aparato electroforético , se distinguen electroforesis de proteínas horizontal y vertical.

Historia y aplicaciones

Después de los primeros experimentos con electroforesis, llevados a cabo en varios laboratorios en las décadas de 1930 y 1940, incluido el pionero de la electroforesis, el premio Nobel Arne Tiselius [7] , en 1955 comenzó un progreso significativo en el desarrollo y aplicación de este método para la separación de proteínas. el desarrollo de la electroforesis en gel de almidón zonal por Oliver Smithies , más tarde también premio Nobel [4] [8] . El método fue mejorado [9] [10] y se utilizó ampliamente en bioquímica experimental y biología molecular.

En 1959, se propuso el método de electroforesis de proteínas en PAAG [5] , en 1962, el método de electroforesis de disco [11] , en 1969, el uso de agentes desnaturalizantes ( SDS ) [12] . En 1970, Laemmli mejoró significativamente la electroforesis en PAAG, separando 28 componentes proteicos del bacteriófago T4 [2] . En 1975 apareció la electroforesis bidimensional (2D) [6] .

La electroforesis de proteínas ha encontrado una amplia aplicación en la investigación biológica, tanto fundamental [2] [4] [13] como aplicada [14] [15] [16] [17] [18] . Hoy en día todavía se utilizan varias variantes del método; por ejemplo, la electroforesis 2D es uno de los métodos para estudiar el proteoma en proteómica [19] .

Véase también

Notas

  1. ↑ Schägger H. , von Jagow G. Electroforesis en gel de tricina-dodecilsulfato de sodio-poliacrilamida para la separación de proteínas en el rango de 1 a 100 kDa  // Bioquímica analítica  : revista  . - Orlando, FL , EE . UU .: Academic Press , 1987. - Vol. 166, núm. 2 . - Pág. 368-379. — ISSN 0003-2697 . — PMID 2449095 .  (Fecha de acceso: 27 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 13 de octubre de 2020. Archivado desde el original el 6 de abril de 2018. 
  2. ↑ 1 2 3 Laemmli Reino Unido . Escisión de proteínas estructurales durante el ensamblaje de la cabeza del bacteriófago T4  (inglés)  // Nature  : revista. - Londres , Reino Unido : Nature Publishing Group , 1970. - vol. 227, núm. 5259 . - Pág. 680-685. — ISSN 1476-4687 . -doi : 10.1038/ 227680a0 . —PMID 5432063 . Archivado desde el original el 27 de febrero de 2015.  (Consulta: 27 de febrero de 2015)
  3. ↑ 1 2 Osterman L. A. Métodos para el estudio de proteínas y ácidos nucleicos: electroforesis y ultracentrifugación (guía práctica). — M .: Nauka , 1981. — 288 p.
  4. ↑ 1 2 3 Smithies O. Electroforesis de zona en geles de almidón: variaciones de grupo en las proteínas séricas de adultos humanos normales  (inglés)  // The Biochemical Journal  : journal. — Londres, Reino Unido: Sociedad Bioquímica ; Portland Press , 1955. vol. 61, núm. 4 . - Pág. 629-641. — ISSN 0264-6021 . — PMID 13276348 . Archivado desde el original el 27 de febrero de 2015.  (Consulta: 27 de febrero de 2015)
  5. ↑ 1 2 Raymond S., Weintraub L. Acrylamide gel as a support medium for zone electrophoresis  // Science  :  journal. - Washington, DC , EE. UU.: Asociación Estadounidense para el Avance de la Ciencia , 1959. - vol. 130, núm. 3377 . - Pág. 711. - ISSN 0036-8075 . — PMID 14436634 .  (Fecha de acceso: 27 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 13 de octubre de 2020. Archivado desde el original el 6 de octubre de 2017. 
  6. ↑ 1 2 O'Farrell PH Electroforesis bidimensional de proteínas de alta resolución  (inglés)  // The Journal of Biological Chemistry: revista. - Baltimore, MD , EE. UU.: Sociedad Estadounidense de Bioquímica y Biología Molecular , 1975. - vol. 250, núm. 10 _ - Pág. 4007-4021. — ISSN 4406-4412 . — PMID 236308 .  (Fecha de acceso: 27 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 27 de febrero de 2015. Archivado desde el original el 18 de enero de 2020. 
  7. ↑ Tiselius A. Un nuevo aparato para el análisis electroforético de mezclas coloidales  (inglés)  // Transactions of the Faraday Society  : revista. - Londres, Reino Unido: Sociedad Faraday , 1937. - Vol. 33. - Pág. 524-531. — ISSN 0014-7672 . -doi : 10.1039/ TF9373300524 .  (Consulta: 28 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 13 de octubre de 2020. Archivado desde el original el 10 de agosto de 2020. 
  8. ↑ Electroforesis: Teoría, Métodos y Aplicaciones / Ed. por M. Bier. - 3ra edición de impresión. - New York, NY , USA: Academic Press, 1964. - P. 225. - 563 p.  (Inglés)  (Fecha de acceso: 27 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace inaccesible) . Consultado el 27 de febrero de 2015. Archivado desde el original el 5 de octubre de 2017. 
  9. ↑ Smithies O. Un procedimiento mejorado para la electroforesis en gel de almidón: más variaciones en las proteínas séricas de individuos normales  //  The Biochemical Journal : journal. — Londres, Reino Unido: Sociedad Bioquímica; Portland Press, 1959. vol. 71, núm. 3 . - Pág. 585-587. — ISSN 0264-6021 . — PMID 13638269 . Archivado desde el original el 27 de febrero de 2015.  (Consulta: 27 de febrero de 2015)
  10. ↑ Gahne B. Estudios sobre la herencia de formas electroforéticas de transferrinas, albúminas, prealbúminas y esterasas plasmáticas de caballos  // Genetics  :  journal. - Baltimore, MD, EE. UU.: Sociedad de Genética de América , 1966. - vol. 53, núm. 4 . - Pág. 681-694. — ISSN 0016-6731 . —PMID 5960258 .  (Fecha de acceso: 27 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 27 de febrero de 2015. Archivado desde el original el 5 de octubre de 2017. 
  11. ↑ Ornstein L., Electroforesis de disco Davis BJ . — Rochester, NY , EE. UU.: Industrias de productos de destilación, Eastman Kodak Co. , 1962.  (inglés)
  12. ↑ Weber K., Osborn M. La fiabilidad de las determinaciones de peso molecular mediante electroforesis en gel de dodecilsulfato-poliacrilamida  (inglés)  // The Journal of Biological Chemistry: revista. - Baltimore, MD, EE. UU.: Sociedad Estadounidense de Bioquímica y Biología Molecular, 1969. - vol. 244, núm. 16 _ - Pág. 4406-4412. — ISSN 0021-9258 . —PMID 5806584 .  (Fecha de acceso: 27 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 13 de octubre de 2020. Archivado desde el original el 18 de enero de 2020. 
  13. ↑ Hunter RL, Merkert CL Demostración histoquímica de enzimas separadas por electroforesis de zona en geles de almidón // Ciencia. - 1957. - vol. 125. - Pág. 1294-1295. (Inglés)
  14. ↑ Baker CMA Genética molecular de proteínas aviares. IX. Variación interespecífica e intraespecífica de proteínas de clara de huevo del género Gallus  (inglés)  // Genética: revista. - Baltimore, MD, EE. UU.: Genetics Society of America, 1968. - vol. 58, núm. 2 . - Pág. 211-226. — ISSN 0016-6731 . —PMID 5960258 .  (Fecha de acceso: 27 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 27 de febrero de 2015. Archivado desde el original el 6 de octubre de 2017. 
  15. ↑ Baker CMA, Croizier G., Stratil A., Manwell C. Identidad y nomenclatura de algunos polimorfismos de proteínas de huevos de gallina y sueros  //  Avances en genética: revista. - Nueva York, NY, EE. UU.: Academic Press, 1970. - vol. 15. - Pág. 147-174. — ISSN 0065-2660 . — PMID 4936422 .  (Fecha de acceso: 27 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 13 de octubre de 2020. Archivado desde el original el 13 de octubre de 2020. 
  16. ↑ Romanov MN (1988-06-07). “Estudio del polimorfismo genético de ovoproteínas en algunas líneas de pollos tipo huevo y tipo carne-huevo” . resúmenes _ IV Simposio de Jóvenes Científicos Avícolas. Cracovia , Polonia : Asociación Mundial de Ciencias Avícolas, rama polaca. pags. 10. OCLC  899128291. _ Consultado el 18-10-2020 . (Inglés)
  17. ↑ Romanov MN (1994-01-27). “Estudio electroforético de loci de ovoproteínas en poblaciones de gallinas de huevo durante el desarrollo del cruce Highsex Brown” . Tez. informe _ Yo Interno. conferencia on Molecular Genetic Markers of Animals, Kiev , 27-29 de enero de 1994. Kiev, Ucrania : Ukr. académico agrario Ciencias , Instituto de Genética y Mejoramiento Animal, Instituto de Agroecología y Biotecnología; Ciencia de la agricultura. páginas. 34-35. OCLC  899128337 . TsNShB , TRN: RU9815007X . Consultado el 28 de febrero de 2015 . Archivado desde el original el 6 de octubre de 2017.
  18. ↑ Romanov MN; Chernikov VF (1994-01-27). “Ovosardillas polimórficas como marcadores de variabilidad intrapoblacional en gaviotas reidoras” . Tez. informe _ Yo Interno. conferencia on Molecular Genetic Markers of Animals, Kyiv, 27-29 de enero de 1994. Kyiv, Ucrania: Ukr. académico agrario Ciencias, Instituto de Genética y Mejoramiento Animal, Instituto de Agroecología y Biotecnología; Ciencia de la agricultura. páginas. 35-36. OCLC  899128260 . Consultado el 28 de febrero de 2015 . Parámetro obsoleto utilizado |coauthors=( ayuda ) Archivado desde el original el 8 de agosto de 2020.
  19. ↑ Komatsu S., Kojima K., Suzuki K., Ozaki K., Higo K. Base de datos de proteoma de arroz basada en electroforesis bidimensional en gel de poliacrilamida: su estado en 2003  // Nucleic Acids Research  : revista  . - Oxford , Reino Unido: Oxford University Press , 2004. - vol. 32, núm. Problema de la base de datos . - Pág. D388-D392. — ISSN 0305-1048 . — IDPM 14681440 .  (Consulta: 28 de febrero de 2015) Copia archivada (enlace no disponible) . Consultado el 13 de octubre de 2020. Archivado desde el original el 3 de junio de 2018. 

Literatura

Enlaces