Electroforesis en gel de poliacrilamida

La electroforesis en gel de poliacrilamida ( abbr. electroforesis PAAG, electroforesis PAAG; PAGE en inglés  , electroforesis en gel de poliacrilamida ) es un método de biología molecular y bioquímica utilizado para separar proteínas y ácidos nucleicos , basado en el movimiento de macromoléculas biológicas cargadas en un campo eléctrico constante . La separación en un gel de poliacrilamida se produce debido a diferencias en la carga de las moléculas que se separan y diferencias en los pesos moleculares , así como en la configuración de las moléculas. Comparte el llamado. electroforesis PAAG no desnaturalizante o nativa (en la que las macromoléculas biológicas a separar permanecen en su estado nativo durante la electroforesis) y electroforesis PAAG desnaturalizante (en la que las muestras son predesnaturalizadas , en el caso de los ácidos nucleicos, calentamiento breve de la muestra con formamida o glioxal , para la desnaturalización de la proteína generalmente usando la ebullición de la muestra en un tampón que contiene un detergente iónico fuerte (generalmente dodecilsulfato de sodio ) y un agente que destruye la estructura cuaternaria de la proteína debido a la destrucción de los puentes disulfuro entre la proteína glóbulos y dentro de la cadena polipeptídica - beta-mercaptoetanol ). En el proceso de electroforesis PAAG desnaturalizante, las moléculas se conservan en un estado desnaturalizado debido a la presencia de agentes caotrópicos en el gel (generalmente urea ) en el caso de la electroforesis PAAG de ácidos nucleicos y proteínas y la presencia de agentes iónicos (por ejemplo, sodio sulfato de dodecilo, bromuro de cetiltrimetilamonio ) y detergentes no iónicos (por ejemplo , tween-20 ).

Véase también

Notas

  1. Reino Unido Laemmli. Escisión de proteínas estructurales durante el ensamblaje de la cabeza del bacteriófago T4. Naturaleza, 1970; V.227, págs. 680–685