Reacciones químicas de color : un cambio en el color de varias estructuras macro y microscópicas de hongos bajo la influencia de ciertos reactivos químicos . El método de investigación química se utiliza en la identificación de muestras de hongos para distinguir entre grupos taxonómicos . Un carácter taxonómico puede ser un resultado de prueba positivo o negativo, o variaciones en el cambio de color con reacciones positivas, ya que el mismo reactivo puede dar diferentes colores en diferentes especies de hongos.
Se pueden realizar pruebas simples para detectar reacciones características de la pulpa del cuerpo fructífero como un todo, o exámenes microscópicos para detectar reacciones de color de hifas , esporas , basidios y otros elementos de trama o micelio . Los estudios pueden llevarse a cabo en especímenes de hongos recién recolectados y algunos en especímenes de herbario .
Los signos macroscópicos de cuerpos fructíferos y, a veces, los signos que se encuentran en el examen microscópico, pueden no ser suficientes para una definición inequívoca. En tales casos, las reacciones químicas de color se utilizan como criterio adicional para los taxones .
Los reactivos analíticos utilizados en la mayoría de los casos no son específicos para determinadas sustancias o complejos de sustancias contenidos en los hongos, pero muchas veces resultan ser específicos para determinados taxones de hongos, lo que permite que el método sea ampliamente utilizado. Algunas de las reacciones utilizadas son específicas, por ejemplo, una reacción positiva con bencidina y α-naftol indica la presencia de la enzima lacasa en la pulpa del hongo , con fenol - tirosinasa, y la prueba de amiloide permite no solo determinar la presencia de polisacáridos específicos ( glucanos ) en las células, pero también sacar ciertas conclusiones sobre la estructura de sus macromoléculas.
El método químico fue utilizado por primera vez en 1866 por el botánico finlandés William Nylander (1822-1899) para la taxonomía de los líquenes . Nylander notó que diferentes especies reaccionan de manera diferente a la exposición a soluciones de álcalis, hipocloritos , yodo , sales de hierro y otros reactivos.
Más tarde, Müller estudió los efectos de los productos químicos en los hongos poliporosos y encontró la aparición de una coloración púrpura en Hapalopilus nidulans ; Harley descubrió la desaparición del color púrpura de la pulpa del hongo de leche negra bajo la acción del álcali. A lo largo del siglo XX, muchos micólogos de renombre estudiaron el efecto de los reactivos químicos sobre los hongos ( W. Meltzer , 1924; J. Schaeffer y F. Möller, 1938; R. Kühner y A. Romagnesi , 1953; R. Singer , 1951, 1962, 1969, 1975; A. Meixner, 1975; S. P. Wasser , 1980, 1992). Los datos más completos sobre las reacciones químicas de color de los hongos basdiales se encuentran en los trabajos de Küner y Romagnesi, Singer (1975), Meixner, Wasser. Para los líquenes, el método químico fue estudiado en profundidad en la década de 1930 por el micólogo japonés Ya. Asahina [1] y descrito en detalle por A. N. Oksner . [2]
Con respecto al método químico en sí mismo, existen dos opiniones contrapuestas entre los micólogos:
S. P. Wasser [3] da dos citas que caracterizan ambos enfoques existentes:
De vez en cuando, se intenta utilizar experimentos químicos para determinar los tipos de hongos y líquenes, lo que a menudo provoca una tormenta de protestas. Sin embargo, en un grupo que es difícil de clasificar y cuyo número de caracteres es pequeño o, por el contrario, muy diverso, la información adicional solo debe ser bienvenida.
— A. Burges [4]
El método químico, como uno de los más convenientes, rápidos y confiables, ya que brinda información adicional en los juicios sobre las especies y otros taxones, debe ser ampliamente utilizado, pero sin falta junto con otros métodos de taxonomía, especialmente los morfológicos.
- A. N. Oksner, Clave para los líquenes de la URSS. Morfología, taxonomía y distribución geográfica [5]
Los resultados del estudio a menudo se escriben en forma de resumen utilizando fórmulas químicas (para reactivos inorgánicos) o abreviaturas, que pueden diferir de un autor a otro, por lo que las listas de convenciones se dan en las publicaciones. Dependiendo de la aplicabilidad de la reacción a un grupo taxonómico dado, solo se puede informar un resultado positivo o negativo (por ejemplo, la entrada "KOH+"/"KOH-" significa una reacción positiva/negativa con álcali) o un cambio de color puede indicarse (por ejemplo, "KOH+ se vuelve amarillo"). También se indica una parte del cuerpo fructífero o una determinada microestructura si la acción del reactivo no es la misma para diferentes estructuras del hongo [6] [7] .
El amiloide es la capacidad de las estructuras para teñirse bajo la acción de las soluciones de yodo . Normalmente se utiliza el reactivo de Meltzer : se añade un volumen igual de hidrato de cloral a una solución acuosa que contiene 2,5% de yodo y 7,5% de yoduro de potasio . La reacción se usa como macroscópica y para teñir preparaciones bajo microscopía, lo que permite determinar la amiloide de varias estructuras: esporas, hifas , basidio . La amiloididad también se manifiesta en muestras que se han almacenado en un herbario durante mucho tiempo (más de 100 años) (según Singer, 1975) [8] . La presencia y el grado de amiloide permite determinar las características estructurales de las moléculas de glucano - polisacáridos similares al almidón , así como el espesor de la capa de glucano en la superficie de las estructuras microscópicas del hongo. El yodo se adsorbe en el caso de una capa superficial fuertemente desarrollada en los canales entre las cadenas de glucano. Si las cadenas están muy ramificadas, la reacción da un color amarillo-marrón, en presencia de cadenas menos ramificadas, aparece la propia reacción amiloide, azul intenso, similar a la reacción del yodo del almidón conocida en química analítica. Por lo general, se distinguen estructuras no amiloides (no se tiñen), dextrinoides o pseudo- amiloides (se tiñen en tonos amarillos y marrones) y amiloides (se tiñen en azul, azul, casi negro) [12] .
En 2005, V. A. Spirin y coautores [13] propusieron determinar el grado de gradación de esta reacción de acuerdo con la escala de color (entre paréntesis - designación de color según la escala de J. Petersen [Petersen, 1996]):
Reacción cruzada de Schaeffer : se aplica sobre el corte con una varilla de vidrio una tira de solución de anilina, y luego, atravesándola, una tira de ácido nítrico al 65%. Con una reacción positiva, aparece una mancha de color amarillo cromo en la intersección, luego el color cambia a rojo anaranjado. La reacción de Schaeffer es un rasgo intragenérico importante para el género Agaricus . Adecuado para material almacenado durante mucho tiempo en el herbario. Descubierto por Yu Sheffer en 1933 [8]
La tinción con colorantes orgánicos se utiliza tanto para mejorar las propiedades ópticas de preparaciones microscópicas como para caracterizar estructuras teñidas. Por ejemplo, cuando se tiñe con tintes de toluidina ( azul de cresilo ), se distingue cianofilia , una tinción azulada y metacromasia , una tinción rosa rojiza o violeta rojiza.