Células madre

La versión actual de la página aún no ha sido revisada por colaboradores experimentados y puede diferir significativamente de la versión revisada el 11 de noviembre de 2018; las comprobaciones requieren 89 ediciones .

Células madre
Micrografía electrónica de transmisión de una célula madre mesenquimatosa que muestra características ultraestructurales típicas
Archivos multimedia en Wikimedia Commons

Las células madre  son células indiferenciadas (inmaduras) que se encuentran en muchos tipos de organismos multicelulares . Las células madre son capaces de autorrenovarse, formando nuevas células madre, dividiéndose por mitosis y diferenciándose en células especializadas, es decir, convirtiéndose en células de diversos órganos y tejidos .

Antecedentes históricos

• 1909: El término "célula madre" (en el original " Stammzelle alemán  ") se propuso para un uso generalizado el 1 de junio de 1909 en una reunión de hematólogos en Berlín , donde el histólogo ruso-estadounidense Alexander Maximov describió las células madre hematopoyéticas utilizando los métodos de su época en el informe presentado " Linfocito como célula madre común de varios elementos sanguíneos en el desarrollo embrionario y la vida postfetal de los mamíferos " [1] :

Ahora he descubierto que estas células sanguíneas primitivas, como las llamo, no son en modo alguno eritroblastos, como sugeriría el punto de vista convencional, sino elementos completamente indiferenciados con un núcleo ligero y redondo y un protoplasma basófilo estrecho; no son glóbulos rojos ni blancos, aunque lo más probable es que todavía se los llame glóbulos blancos, ya que a veces, especialmente en los pollos, tienen forma ameboidea y son muy similares a los linfocitos grandes. Se multiplican aún más y, al principio, su número también aumenta al reemplazar las células endoteliales en los vasos primitivos.

• 1970: Primeros trasplantes de células madre autólogas (propias) [2] [3] . Según algunos informes, en los años 70, los miembros mayores del Politburó del Comité Central del PCUS recibieron "vacunas juveniles" 2-3 veces al año, inyectando preparaciones de células madre [4] .
• 1978: Se encuentran células madre hematopoyéticas en la sangre del cordón umbilical [5] .
• 1981: Las células embrionarias de ratón se derivan del embrioblasto (la masa celular interna del blastocisto ) por Martin Evans , Matthew Kaufman e, independientemente, Gail R. Martin. La introducción del término "célula madre embrionaria" se atribuye a Gail Martin.
• 1992: Células madre neurales derivadas in vitro . Se han desarrollado protocolos para su cultivo en forma de neuroesferas .
• 1997: Un nuevo enfoque para el uso de células madre en el tratamiento de la insuficiencia renal fue el concepto de utilizar un "sistema auxiliar bioartificial de túbulos renales" (Bioartifical renal tubule assist device, RAD). Esta es una adición a la diálisis "ordinaria": un sistema de membranas tubulares, cuya superficie interna sirve como soporte para las células EPC diferenciadas de las SC. El sistema complementa el aparato de "riñón artificial", mientras que la sangre del paciente se filtra a través de membranas, intercambiando sustancias de bajo peso molecular con células EPC vivas fijadas en ellas [6] [7] .
• 1998: James Thomson y sus colaboradores de la Universidad de Wisconsin-Madison desarrollaron la primera línea de ESC humanas (células madre embrionarias).
• 1999: La revista Science reconoce el descubrimiento de las células madre embrionarias como el tercer avance más importante de la biología, tras descifrar la doble hélice del ADN y el Proyecto Genoma Humano .
• En 1999, bajo la dirección de Humes HD, se creó un sistema en el que se utilizaron las células epiteliales de los túbulos renales proximales de los lechones , multiplicadas en varios pases . Así, el uso de una "batería" de tales cartuchos puede lograr una compensación casi fisiológica de las funciones metabólicas y endocrinas [8] [9] .
• 2005: La lista de enfermedades para las que se ha aplicado con éxito el trasplante de células madre alcanza varias decenas. La atención se centra en el tratamiento de neoplasias malignas , diversas formas de leucemia y otras enfermedades de la sangre . Hay informes de trasplantes exitosos de células madre para enfermedades de los sistemas cardiovascular y nervioso . Varios centros de investigación están realizando investigaciones sobre el uso de células madre en el tratamiento del infarto de miocardio y la insuficiencia cardíaca . Se han desarrollado protocolos internacionales para el tratamiento de la esclerosis múltiple . Se están buscando enfoques para el tratamiento de las enfermedades de accidente cerebrovascular , Parkinson y Alzheimer .
• Agosto de 2006: la revista Cell publica un estudio [10] de Kazutoshi Takahashi y Shinya Yamanaka sobre una forma de devolver las células diferenciadas a un estado pluripotente . Comienza la era de las células madre pluripotentes inducidas .
• Enero de 2007: Investigadores de la Universidad de Wake Forest ( Carolina del Norte , EE . UU .) dirigidos por el Dr. Anthony Atala de Harvard informaron [11] del descubrimiento de un nuevo tipo de célula madre que se encuentra en el líquido amniótico (líquido amniótico). Pueden convertirse en un reemplazo potencial para los ESC en investigación y terapia.
• Junio ​​de 2007: tres grupos de investigación independientes informan que las células maduras de la piel del ratón se pueden reprogramar en ESC. En el mismo mes, el científico Shukhrat Mitalipov anunció la creación de una línea de células madre de primates a través de la clonación terapéutica .
• Noviembre de 2007: se publicó un estudio de Kazutoshi Takahashi y Shinya Yamanaka "Inducción de células madre pluripotentes de fibroblastos humanos maduros bajo ciertos factores" [12] en la revista Cell , y se publicó un artículo "Células madre pluripotentes inducidas derivadas de células somáticas humanas ". publicado en la revista Science [13 ] Junying Yu, en coautoría con otros científicos del grupo de investigación de James Thomson. Se ha demostrado que es posible inducir casi cualquier célula humana madura y dotarla de propiedades de tallo, eliminando la necesidad de destruir embriones en el laboratorio, aunque quedan por determinar los riesgos de carcinogénesis asociados al gen Myc y la transferencia de genes retrovirales .
• Enero de 2008: Robert Lanza y sus colegas de Advanced Cell Technology y la Universidad de California, San Francisco, produjeron los primeros ESC humanos sin destruir el embrión [14] .
• Enero de 2008: Se cultivan blastocistos humanos clonados mediante clonación terapéutica .
• Febrero de 2008: células madre pluripotentes derivadas de hígado y estómago de ratón , estas células inducidas están más cerca de embrionarias que las células madre inducidas derivadas previamente y no son cancerígenas. Además, los genes requeridos para inducir células pluripotentes no necesitan estar ubicados en una región específica, lo que contribuye al desarrollo de tecnologías de reprogramación celular no viral .
• Octubre de 2008: Sabina Konrad y sus colegas de Tübingen ( Alemania ) obtuvieron células madre pluripotentes de células espermatogoniales de un testículo humano maduro mediante cultivo in vitro con la adición de PIL (factor inhibidor (supresión) de la leucemia).
• 30 de octubre de 2008: Células madre embrionarias derivadas de cabello humano [15] .
• Diciembre de 2008: Primer estudio publicado por médicos de la Clínica Centeno-Schultz sobre la regeneración exitosa del cartílago en la rodilla humana utilizando MSC maduras autólogas [16] .
• 1 de marzo de 2009: Andreas Nagy, Keisuke Kaji y sus colegas han descubierto una forma de derivar células madre embrionarias a partir de células maduras normales utilizando una innovadora tecnología de envoltura para entregar genes específicos en las células para su reprogramación sin los riesgos asociados con los virus . La colocación de genes en una célula se lleva a cabo mediante electroporación .
• 28 de mayo de 2009: Kim Gwangsu y sus colegas de Harvard anunciaron que habían desarrollado una forma de manipular las células de la piel para producir células madre pluripotentes inducidas de una manera específica para el paciente, afirmando que esta es "la solución definitiva al problema de las células madre". "
• 2011: el investigador israelí Inbar Friedrich Ben-Nun dirigió un equipo de científicos que desarrolló las primeras células madre de especies animales en peligro de extinción [17] . Este es un gran avance, y gracias a él se pueden salvar especies que están en peligro de extinción [18] .
• 2012: Inyectar a pacientes con células madre extraídas de su propia médula ósea tres o siete días después de un infarto de miocardio es un tratamiento seguro pero ineficaz, según un estudio clínico respaldado por los Institutos Nacionales de Salud de EE. UU. Sin embargo, los estudios realizados por especialistas alemanes en el departamento de cardiología de Hamburgo mostraron resultados positivos en el tratamiento de la insuficiencia cardíaca, pero no del infarto de miocardio. [19]
• 2012: Un grupo de investigadores japoneses liderados por el profesor Mitinori Saito de la Universidad de Kioto, por primera vez en la historia de la ciencia, pudieron cultivar óvulos a partir de células madre, fertilizarlos y lograr el nacimiento de crías sanas en ratones de laboratorio. El 5 de octubre, en la edición electrónica de la revista científica Science , sugirieron que los resultados de su investigación contribuirán a la solución del problema de la infertilidad . [veinte]
• 23 de enero de 2013: El mismo grupo del Centro de Investigación y Aplicación de Células Madre de la Universidad de Kyoto cultivó células germinales, suprarrenales y renales a partir de células madre: se obtuvieron cinco tipos de células renales y también se obtuvo un fragmento del túbulo renal involucrado en la filtración de sangre. crecido. [21] [22]
• 5 de agosto de 2013: Como resultado de muchos años de experiencia de los investigadores de la Universidad de Maastricht en la forma de resolver el problema de la escasez de alimentos en el mundo, se ha creado carne para una hamburguesa de 140 gramos . Está "tejido" a partir de 20.000 fibras de proteína cultivadas en tres meses a partir de células madre de vaca. En su producción se han invertido 250.000 euros [23] [24] .
• 2019: Los genetistas de California crean una terapia génica que hace que las células madre sean "invisibles" para el sistema inmunitario humano. Se llevó a cabo un experimento exitoso en ratones "humanizados" [25] [26] .
• Marzo de 2020: Adam Castillejo es la segunda persona en el mundo en curarse del VIH mediante un trasplante de células madre de médula ósea.

Propiedades

Todas las células madre tienen dos propiedades esenciales:

• Autorrenovación, es decir, la capacidad de mantener un fenotipo inalterado después de la división (sin diferenciación).
• Potencia (potencial de diferenciación), o la capacidad de producir descendencia en forma de tipos de células especializadas.

Autorrenovación

Hay dos mecanismos que mantienen la población de células madre en el cuerpo:

1. División asimétrica, en la que se forman dos células diferentes (una célula madre y una célula diferenciada [27] ).
2. División estocástica: algunas células madre se dividen en dos más especializadas, mientras que otras, al dividirse, dan lugar a dos células madre.

Potencial diferenciador

Fueron clasificados por Weigers y Weisman según su capacidad para producir líneas celulares.

El potencial diferenciador, o potencia, de las células madre es la capacidad de producir una cierta cantidad de tipos diferentes de células. Según la potencia, las células madre se dividen en los siguientes grupos:

• Las células madre totipotentes (omnipotentes) pueden diferenciarse en células de tejidos embrionarios y extraembrionarios organizados como estructuras conectadas tridimensionales (tejidos, órganos, sistemas de órganos, organismo). Tales células pueden dar lugar a un organismo viable de pleno derecho. Estos incluyen un óvulo fertilizado o cigoto. Las células formadas durante los primeros ciclos de la división del cigoto también son totipotentes en la mayoría de las especies. Sin embargo, no incluyen, por ejemplo, los gusanos redondos , cuyo cigoto pierde la totipotencia en la primera división. En algunos organismos, las células diferenciadas también pueden volverse totipotentes. Entonces, la parte cortada de la planta se puede usar para hacer crecer un nuevo organismo precisamente debido a esta propiedad.
• Las células madre pluripotentes son descendientes de las células madre totipotentes y pueden dar lugar a casi todos los tejidos y órganos, con la excepción de los tejidos extraembrionarios (por ejemplo, la placenta ). Tres capas germinales se desarrollan a partir de estas células madre : ectodermo , mesodermo y endodermo . En 2015, los científicos descubrieron un nuevo tipo de célula, las células madre pluripotentes selectivas de región. Independientemente colonizan una u otra área del cuerpo del embrión, después de lo cual pueden convertirse en células de varios tejidos [28] .
• Las células madre multipotentes dan origen a células de diferentes tejidos, pero la diversidad de sus tipos está limitada por los límites de una capa germinal. El ectodermo da lugar al sistema nervioso , los órganos de los sentidos , las secciones anterior y posterior del tubo intestinal , el epitelio de la piel . El cartílago y el esqueleto óseo , los vasos sanguíneos , los riñones y los músculos se forman a partir del mesodermo . A partir del endodermo -dependiendo de la especie- se forman diversos órganos encargados de la respiración y la digestión . En los seres humanos, estos son la mucosa intestinal , el urotelio de la vejiga [29] , así como el hígado , el páncreas y los pulmones .
• Las células oligopotentes pueden diferenciarse solo en ciertos tipos de células que tienen propiedades similares. Estos, por ejemplo, incluyen células de la serie linfoide y mieloide involucradas en el proceso de hematopoyesis .
• Las células unipotentes (células predecesoras, células blásticas) son células inmaduras que, en sentido estricto, ya no son células madre, ya que solo pueden producir un tipo de célula. Son capaces de múltiples autorreplicaciones, lo que las convierte en una fuente a largo plazo de células de un tipo específico y las distingue de las células no madre. Sin embargo, su capacidad para reproducirse se limita a un cierto número de divisiones, lo que también las distingue de las verdaderas células madre. Las células progenitoras incluyen, por ejemplo, algunos de los miosatelocitos implicados en la formación de tejidos esqueléticos y musculares.

Clasificación

Las células madre se pueden dividir en tres grupos principales según la fuente de su recepción: embrionarias, fetales y posnatales (células madre adultas).

Células madre embrionarias

Las células madre embrionarias (ESC) forman la masa celular interna (ICM), o embrioblasto , al principio del desarrollo del embrión . Son pluripotentes .

Una ventaja importante de las ESC es que no expresan HLA (antígenos leucocitarios humanos), es decir, no producen antígenos de compatibilidad tisular . Cada individuo tiene un conjunto único de estos antígenos , y el desajuste entre el donante y el receptor es una de las principales causas de incompatibilidad en el trasplante . En consecuencia, la posibilidad de que las células embrionarias del donante sean rechazadas por el cuerpo del receptor es muy baja.

Cuando se trasplantan a animales inmunodeficientes , las células madre embrionarias pueden formar tumores de una estructura compleja (multitejido): teratomas , algunos de los cuales pueden volverse malignos. No hay datos fiables sobre cómo se comportan estas células en un organismo inmunocompetente, por ejemplo, en el cuerpo humano. Al mismo tiempo, cabe señalar que ya se han iniciado ensayos clínicos con derivados diferenciados (células derivadas) de ESC.

Una de las principales desventajas de las ESC es la imposibilidad de utilizar material autógeno, es decir, propio, durante el trasplante, ya que el aislamiento de las ESC de un embrión es incompatible con su desarrollo posterior.

Células madre fetales

Las células madre fetales se obtienen de material fetal después de un aborto (por lo general, la edad gestacional, es decir, el desarrollo intrauterino del feto, es de 9 a 12 semanas) [30] . Las células madre fetales son una mezcla de células madre multipotentes y unipotentes [31] [32] . Naturalmente, el estudio y uso de dicho biomaterial también plantea problemas éticos. Otro problema es el mercado ilegal de preparados de células madre fetales en Rusia [33] . La empresa británica ReNeuron está investigando el uso de células madre fetales para el tratamiento de accidentes cerebrovasculares . Estas células ya han comenzado a diferenciarse y, por lo tanto, cada una de ellas, en primer lugar, solo puede sufrir un número limitado de divisiones y, en segundo lugar, dar lugar no a ninguna, sino a ciertos tipos de células especializadas. Por lo tanto, las células hepáticas especializadas y las células hematopoyéticas pueden desarrollarse a partir de células hepáticas fetales . A partir del tejido nervioso fetal , en consecuencia, se desarrollan células nerviosas más especializadas .

Células madre posnatales

A pesar de que las células madre de un organismo maduro tienen una potencia menor en comparación con las células madre embrionarias y fetales, es decir, pueden generar un menor número de tipos diferentes de células, el aspecto ético de su investigación y uso no suscita serias controversias . . Además, la posibilidad de utilizar material autógeno asegura la eficacia y seguridad del tratamiento. Las células madre adultas se pueden dividir en tres grupos principales: hematopoyéticas (hematopoyéticas), mesenquimales multipotentes (estromales) y células progenitoras específicas de tejido .

A veces, las células de la sangre del cordón umbilical se aíslan en un grupo separado, ya que son las menos diferenciadas de todas las células de un organismo maduro , es decir, tienen la mayor potencia. La sangre del cordón umbilical contiene principalmente células madre hematopoyéticas, así como células madre mesenquimales multipotentes, pero contiene pequeñas cantidades de otros tipos de células madre que, bajo ciertas condiciones, son capaces de diferenciarse en células de varios órganos y tejidos.

Células madre hematopoyéticas

Las células madre hematopoyéticas (HSC) son células madre multipotentes que dan lugar a todas las células sanguíneas de la serie mieloide ( monocitos , macrófagos , neutrófilos , basófilos , eosinófilos , eritrocitos , megacariocitos y plaquetas , células dendríticas ) y linfoide ( linfocitos T , B- linfocitos y asesinos naturales ). La definición de células hematopoyéticas se ha revisado fundamentalmente en los últimos 20 años. El tejido hematopoyético contiene células con capacidades de regeneración a corto y largo plazo , incluidas células multipotentes, oligopotentes y progenitoras. El tejido mieloide contiene una HSC por cada 10.000 células. Las HSC son una población heterogénea . Hay tres subpoblaciones de HSC, según la relación proporcional de progenie linfoide a mieloide (L/M). Las HSC con orientación mieloide tienen una relación L/M baja (>0, <3), mientras que las HSC con orientación linfoide tienen una relación alta (>10). El tercer grupo consta de HSC "equilibradas", para las cuales 3 ≤ L/M ≤ 10. Actualmente, las propiedades de varios grupos de HSC se están estudiando activamente, sin embargo, los resultados intermedios muestran que solo las HSC orientadas a mieloides y "equilibradas" son capaz de autorreproducirse a largo plazo. Además, los experimentos de trasplante han demostrado que cada grupo de HSC replica preferentemente su propio tipo de células sanguíneas, lo que sugiere un programa epigenético heredado para cada subpoblación.

La población de HSC se forma durante la embriogénesis , es decir, el desarrollo embrionario. Se ha comprobado que en los mamíferos, las primeras HSC se encuentran en regiones del mesodermo llamadas aorta , gónada y mesonefros , antes de la formación de la médula ósea, la población se expande en el hígado fetal. Dichos estudios contribuyen a la comprensión de los mecanismos responsables de la génesis (formación) y expansión de la población de HSC y, en consecuencia, al descubrimiento de agentes biológicos y químicos (sustancias activas) que finalmente pueden usarse para el cultivo de HSC in vitro . .

La principal fuente de HSC es la médula ósea . Esta fuente sigue siendo la más utilizada en la trasplantología en la actualidad (ver Trasplante de células madre hematopoyéticas ). Las HSC se encuentran en la médula ósea de los adultos, incluidos los huesos pélvicos , las costillas , el esternón y otros huesos. Las células se pueden obtener directamente de los huesos pélvicos con una aguja y una jeringa, o de la sangre, después de un tratamiento previo con citoquinas , incluido el G-CSF (factor estimulante de colonias de granulocitos), que promueve la liberación de células madre de la médula ósea.

Células madre mesenquimales multipotentes

Las células estromales mesenquimales multipotentes (MMSC) son células madre multipotentes capaces de diferenciarse en osteoblastos (células de tejido óseo), condrocitos (células de cartílago) y adipocitos (células grasas).

Los precursores de las MMSC durante el período de desarrollo embriogénico son las células madre mesenquimales (MSC). Se pueden encontrar en la distribución del mesénquima , es decir, el tejido conectivo germinal.

La principal fuente de MMSC es la médula ósea . Además, se encuentran en el tejido adiposo y en una serie de otros tejidos con un buen suministro de sangre . Existe alguna evidencia de que el nicho de tejido natural de las MMSC se encuentra perivascularmente alrededor de los vasos sanguíneos. Además, se han encontrado MMSC en la pulpa de los dientes de leche, líquido amniótico (amniótico) , sangre del cordón umbilical y gelatina de Wharton del cordón umbilical. Estas fuentes se investigan pero rara vez se aplican en la práctica. Por ejemplo, el aislamiento de MMSC jóvenes de la gelatina de Wharton es un proceso extremadamente laborioso, ya que las células que contiene también se encuentran perivascularmente. En 2005-2006, los especialistas de MMSC definieron oficialmente una serie de parámetros que las células deben cumplir para clasificarlas como población de MMSC. Se han publicado artículos que presentan el inmunofenotipo MMSC y las direcciones de la diferenciación ortodoxa. Estos incluyen la diferenciación en células de tejido óseo, adiposo y cartilaginoso.

Se han llevado a cabo varios experimentos para diferenciar las MMSC en células similares a neuronas, pero los investigadores todavía dudan de que las neuronas resultantes sean funcionales. También se están llevando a cabo experimentos en el campo de la diferenciación de MMSC en miocitos- células de tejido muscular . El área de aplicación clínica más importante y prometedora de las MMSC es el cotrasplante con HSC para mejorar el injerto de una muestra de médula ósea o células madre de sangre del cordón umbilical.

Numerosos estudios han demostrado que las MMSC humanas pueden evitar el rechazo de trasplantes, interactuar con las células dendríticas y los linfocitos T y crear un microambiente inmunosupresor mediante la producción de citoquinas. Se ha demostrado que las funciones inmunomoduladoras de las MMSC humanas mejoran cuando se trasplantan a un entorno inflamado con mayores niveles de interferón gamma . Otros estudios contradicen estos hallazgos, debido a la naturaleza heterogénea de las MSC aisladas y las diferencias significativas entre ellas, según el método de cultivo.

Los MSC se pueden activar si es necesario. Sin embargo, su eficiencia es relativamente baja. Entonces, por ejemplo, el daño muscular incluso después del trasplante de MSC se cura muy lentamente. Actualmente, se están realizando estudios sobre la activación de MSC. Estudios previos sobre el trasplante intravenoso de MSC han demostrado que este método de trasplante a menudo conduce a una crisis de rechazo y sepsis . Hoy en día, se reconoce que las enfermedades de los tejidos periféricos, por ejemplo, la inflamación intestinal, se tratan mejor no mediante trasplante , sino mediante métodos que aumentan la concentración local de MSC.

Sin embargo, los estudios sobre la eficacia del uso de MSC para la reepitelización de la piel dañada, por ejemplo, en el síndrome del pie diabético, han demostrado su eficacia en estudios clínicos [34] .

Células progenitoras específicas de tejido

Las células progenitoras específicas de tejido (células predecesoras) son células poco diferenciadas que se localizan en diversos tejidos y órganos y se encargan de actualizar su población celular, es decir, reemplazan a las células muertas. Estos incluyen, por ejemplo, miosatelocitos (predecesores de las fibras musculares), células precursoras de linfo y mielopoyesis . Estas células son oligo y unipotentes, y su principal diferencia con otras células madre es que las células progenitoras pueden dividirse solo un cierto número de veces, mientras que otras células madre son capaces de autorrenovarse ilimitadamente. Por lo tanto, se cuestiona su pertenencia a verdaderas células madre.

Las células madre neurales, que también pertenecen al grupo específico de tejido, se están estudiando por separado. Se diferencian durante el desarrollo del embrión y durante el período fetal, dando como resultado la formación de todas las estructuras nerviosas del futuro organismo adulto, incluidos los sistemas nerviosos central y periférico . Estas células también se encontraron en el SNC de un organismo adulto, en particular, en la zona subependimaria, en el hipocampo , cerebro olfativo , etc. A pesar de que la mayoría de las neuronas muertas no se reemplazan, el proceso de neurogénesis en el adulto El SNC todavía es posible gracias a las células madre neurales, es decir, la población de neuronas puede "recuperarse", sin embargo, esto ocurre en tal volumen que no afecta significativamente los resultados de los procesos patológicos .

Características de las células madre embrionarias

1. La pluripotencialidad  es la capacidad de formar cualquiera de aproximadamente 350 tipos de células adultas (en mamíferos) [35] ;
2. Homing  : la capacidad de las células madre, cuando se introducen en el cuerpo, para encontrar el área de daño y repararla allí, realizando la función perdida;
3. Totipotencia  : la capacidad de diferenciarse en un organismo completo (11 días después de la fertilización);
4. Los factores que determinan la singularidad de las células madre no se encuentran en el núcleo , sino en el citoplasma . Este es un exceso de ARNm de los 3 mil genes . , que son responsables del desarrollo temprano del embrión ;
5. Actividad de la telomerasa . Con cada replicación, se pierde una parte de los telómeros (ver límite de Hayflick ). Las células madre, germinales y tumorales tienen actividad telomerasa, los extremos de sus cromosomas están construidos, es decir, estas células son capaces de sufrir un número potencialmente infinito de divisiones celulares , son inmortales.

• Células madre embrionarias de ratón con un marcador fluorescente

• Colonia de células madre embrionarias humanas en una capa alimentadora de fibroblastos de ratón

Células madre del cáncer

En 2012, para el glioblastoma , el papiloma y el carcinoma de piel y adenoma de intestino, se demostró la existencia de un grupo limitado de células madre cancerosas específicas., que son las precursoras de otras células, y son las responsables de la formación y crecimiento del tumor [36] .

Uso médico

Se supone que en el futuro, con la ayuda de las células madre, será posible restaurar los tejidos del cuerpo dañados como resultado de una lesión o una enfermedad degenerativa: trasplantar las células madre de un donante a un órgano dañado y obligarlas a dividirse, convirtiéndolas en células. del tipo deseado. Sin embargo, en la actualidad, solo los pacientes con leucemia pueden ser tratados con eficacia de esta manera , mientras que en otras áreas de la medicina, el uso de células madre aún no ha dado resultados fiables: la eficacia de este método de tratamiento no ha sido probada, y los riesgos asociados a ella son evidentes: se conocen casos de tumores como consecuencia del trasplante de células madre de donante [37] .

Sin embargo, a pesar de esto, hay muchas clínicas donde se lleva a cabo un tratamiento semi-subterráneo con células madre para una variedad de enfermedades y con el propósito de rejuvenecer. Por regla general, en estos casos, el tratamiento propuesto no está aprobado y no se ha probado su eficacia y seguridad. Además, la investigación con células madre está asociada con un gran número de publicaciones retractadas y escándalos [37] .

Uso de células madre y cáncer

Hubo un debate activo en los medios de comunicación sobre si las inyecciones de células madre embrionarias provocaban cáncer y la posterior muerte prematura de muchas personas famosas, principalmente artistas: Alexander Abdulov , Vera Glagoleva , Ilya Oleinikov , Lyubov Polishchuk , Dmitry Hvorostovsky , Zhanna Friske , Mikhail Zadornov . , Valentina Tolkunova , Clara Luchko , Anna Samokhina , Oleg Yankovsky y otros [38] . Los análisis de pacientes famosos mostraron que en el cuerpo de los actores hay una renovación, una aceleración de la actividad vital. Sin embargo, pronto aparecieron estadísticas terribles: aquellos que usaron inyecciones de células madre realmente se volvieron más jóvenes y luego muy rápidamente se “agotaron” del cáncer, principalmente del glioblastoma (cáncer cerebral), una enfermedad en gran parte misteriosa, que se caracteriza por múltiples daños genéticos. en las células gliales del cerebro. , lo que conduce al rápido crecimiento expansivo de un tumor maligno.

Después de las inyecciones de células madre, comienza la división activa no solo de las células sanas, sino también patológicas del cuerpo, incluidas las malignas, cuanto más envejece el cuerpo. El impulso temporal de la juventud pasa, y vuelve la decadencia, y luego aparecen varias consecuencias. Entonces, si las células inyectadas echan raíces, entonces, debido a la contradicción con las células del cuerpo y el sistema inmunológico, a menudo degeneran en células cancerosas. En cualquier caso, este es un efecto estresante sobre el sistema inmunológico, contra el cual se puede realizar una patología.

Regulación legislativa

En Rusia

Por Decreto del Gobierno de la Federación Rusa del 23 de diciembre de 2009 No. 2063-r (cláusula 6), el Ministerio de Salud y Desarrollo de Rusia, el Ministerio de Industria y Comercio de Rusia y el Ministerio de Educación y Ciencia de Rusia fueron recibió instrucciones de desarrollar y presentar para su consideración a la Duma Estatal de la Federación Rusa un proyecto de ley "Sobre el uso de tecnologías biomédicas en la práctica médica", que regula el uso médico de células madre [39] [40] como una de las tecnologías biomédicas . Dado que el proyecto de ley causó indignación entre el público y los científicos, se envió a revisión y no se adoptó en ese momento.

El 1 de julio de 2010, el Servicio Federal de Supervisión de Salud y Desarrollo Social emitió la primera[ aclarar ] aprobación para el uso de nueva tecnología médica FS No. 2010/255 (tratamiento con células madre propias). [41]

El 3 de febrero de 2011, el Servicio Federal de Supervisión de Salud y Desarrollo Social emitió un permiso para el uso de nueva tecnología médica FS No. 2011/002 (tratamiento con células madre de donante para las siguientes patologías: cambios en la piel relacionados con la edad de la cara de segundo o tercer grado, la presencia de una herida defecto de la piel, úlcera trófica, tratamiento de la alopecia , lesiones cutáneas atróficas, incluidas las rayas atróficas (estrías), quemaduras, pie diabético).

En 2015, la Duma del Estado aprobó en primera lectura el proyecto de ley "Sobre productos celulares biomédicos", que regula el desarrollo, las pruebas, el registro, la producción, el almacenamiento y la venta de productos de células madre y otros [42] . En 2016, esta ley, que legaliza el uso de tecnologías celulares, incluido el uso de células madre [43] , fue finalmente adoptada por la Duma del Estado, aprobada por el Consejo de la Federación y entró en vigor en enero de 2017 [44] [45] .

En Ucrania

Desde abril de 2013, el Ministerio de Salud de Ucrania ha permitido ensayos clínicos (Orden del Ministerio de Salud de Ucrania No. 630 "Sobre la realización de ensayos clínicos de células madre", 2007 [46] ) para el tratamiento de las siguientes patologías utilizando células madre células: necrosis pancreática, enfermedad por quemaduras, isquemia crónica de las extremidades inferiores. [47]

Opinión pública sobre el uso de células madre

Declaraciones de organizaciones religiosas individuales

Opinión de la Iglesia Ortodoxa Rusa de la Iglesia Ortodoxa Rusa

La Iglesia ortodoxa se opone al uso de células madre, cuyo material se obtiene de los embriones, ya que en el cristianismo el embrión es una persona con alma, y ​​la destrucción del embrión es un pecado de asesinato.

La Iglesia ortodoxa también se opone al estudio de las células madre embrionarias humanas.

Interpretación del ROC de las decisiones de los tribunales de la UE

El 18 de octubre de 2011, el Tribunal Supremo de la Unión Europea "ECJ" reconoció[ aclarar ] en el curso de la aclaración del Artículo 6(2)(c) de la Directiva 98/44/EC del Parlamento Europeo que prohíbe patentar una serie de invenciones, que un óvulo humano debe ser considerado un embrión humano a los efectos de este artículo desde el momento de la fecundación [48] , y prohibió cualquier experimento eugenésico y manipulaciones con células madre embrionarias humanas[ especificar ] . De hecho, el C-34/10 Oliver Brüstle v Greenpeace descartó patentar procesos en los que se extraen células madre de un embrión en estado de blastocisto, destruyendo el embrión [49] [50] [51] [52 ] .

Para 2014, el mismo tribunal había aclarado que un óvulo activado partenogenéticamente todavía no constituía un embrión humano y, por lo tanto, permitió patentes sobre células madre derivadas de óvulos no fertilizados y tecnologías relacionadas [53] [54] .

El Ministerio de Salud y Desarrollo Social de la Federación Rusa apoyó esta decisión del tribunal. [ ¿cuándo? ]

Véase también

• Células madre embrionarias
• Inmortalidad
• neuroesfera
• células madre inducidas
• nicho de células madre
• Reprogramación celular

Notas

1. ↑ * Maximow A. Der Lymphozyt als gemeinsame Stammzelle der verschiedenen Blutelemente in der embrionalen Entwicklung und im postfetalen Leben der Säugetiere Archivado el 29 de junio de 2009 en Wayback Machine . Originalmente en: Folia Haematologica 8.1909, 125-134. Republicado en: Cell Ther Transplant. 2009.1:e.000040.01. doi: 10.3205/ctt-2008-en-000040.01  (alemán)
   • A. Maksimov "Linfocito como célula madre común de varios elementos sanguíneos en el desarrollo embrionario y la vida post-fetal de los mamíferos. Folia Haematologica 8.1909, 125-134.  (rus.)
2. ↑ Jonathan Friedberg, Shahrukh Hashmi. Trasplante de células madre en linfomas no Hodgkin. doi:10.2217/ebo.12.116
3. ↑ Appelbaum FR Trasplante de células hematopoyéticas a los 50. Archivado el 18 de mayo de 2018 en Wayback Machine doi: 10.1056/NEJMp078166
4. ↑ Weinboim, P. Células madre y medicina regenerativa  // Revista Partner. — Dortmund, Alemania: "Socio" MedienHaus GmbH & Co. KG, 2004. - T. 82 , N° 7 . Archivado desde el original el 18 de mayo de 2018.
5. ↑ Prindull G, Prindull B, Meulen N. Células madre hematopoyéticas (CFUc) en sangre de cordón umbilical humano. Archivado el 24 de julio de 2018 en Wayback Machine .
6. ↑ Humes HD, MacKay SM, Funke AJ, Buffington DA. El dispositivo bioartificial de asistencia al túbulo renal para mejorar la CRRT en la insuficiencia renal aguda. Archivado el 18 de mayo de 2018 en Wayback Machine .
7. ↑ E. V. Shlyakhto. medicina traslacional. Colección de artículos científicos, San Petersburgo, 2010. - 416 p., Institución Estatal Federal "FTsSKE llamada así por V. A. Almazov" del Ministerio de Salud y Desarrollo Social de la Federación Rusa.[ aclarar ]
8. ↑ Nikolovski J, Gulari E, Humes HD. Ingeniería de diseño de un dispositivo bioartificial de terapia celular de túbulos renales. Archivado el 23 de julio de 2018 en Wayback Machine .
9. ↑ Humes HD, MacKay SM, Funke AJ, Buffington DA. Ingeniería de tejidos de un dispositivo de asistencia de túbulos renales bioartificial: transporte in vitro y características metabólicas. Archivado el 23 de julio de 2018 en Wayback Machine doi: 10.1046/j.1523-1755.1999.00486.x
10. ↑ Takahashi K, Yamanaka S. Inducción de células madre pluripotentes a partir de cultivos de fibroblastos adultos y embrionarios de ratón mediante factores definidos. Archivado el 17 de junio de 2018 en Wayback Machine doi: 10.1016/j.cell.2006.07.024
11. ↑ Estudio: Líquido amniótico produce células madre. Archivado el 19 de mayo de 2018 en Wayback Machine The Associated Press, 2007.
12. ↑ Kazutoshi Takahashi, Koji Tanabe, Mari Ohnuki, Megumi Narita, Tomoko Ichisaka, Kiichiro Tomoda, Shinya Yamanaka. Inducción de células madre pluripotentes a partir de fibroblastos humanos adultos mediante factores definidos. Archivado el 29 de octubre de 2013 en Wayback Machine doi: 10.1016/j.cell.2007.11.019
13. ↑ Yu J, Vodyanik MA, Smuga-Otto K, Antosiewicz-Bourget J, Frane JL, Tian S, Nie J, Jonsdottir GA, Ruotti V, Stewart R, Slukvin II, Thomson JA. Líneas de células madre pluripotentes inducidas derivadas de células somáticas humanas. Archivado el 22 de septiembre de 2018 en Wayback Machine doi: 10.1126/science.1151526
14. ↑ Chung Y, Klimanskaya I, Becker S, Li T, Maserati M, Lu SJ, Zdravkovic T, Ilic D, Genbacev O, Fisher S, Krtolica A, Lanza R. Líneas de células madre embrionarias humanas generadas sin destrucción de embriones. Archivado el 19 de mayo de 2018 en Wayback Machine doi: 10.1016/j.stem.2007.12.013
15. ↑ Células madre de tipo embrionario de un solo cabello humano. Archivado el 8 de febrero de 2017 en Wayback Machine Nature Reports Stem Cells, 2008. doi: 10.1038/stemcells.2008.142
16. ↑ Centeno CJ, Busse D, Kisiday J, Keohan C, Freeman M, Karli D. Regeneración del cartílago del menisco en una rodilla tratada con células madre mesenquimatosas autólogas implantadas percutáneamente. Archivado el 11 de septiembre de 2017 en Wayback Machine doi: 10.1016/j.mehy.2008.06.042
17. ↑ Ben-Nun IF, Montague SC, Houck ML, Tran HT, Garitaonandia I, Leonardo TR, Wang YC, Charter SJ, Laurent LC, Ryder OA, Loring JF. Células madre pluripotentes inducidas de especies en peligro de extinción. Archivado el 19 de mayo de 2018 en Wayback Machine doi: 10.1038/ nmeth.1706
18. ↑ Científico israelí lidera investigación revolucionaria con células madre sobre especies en peligro de extinción. Archivado el 19 de mayo de 2018 en Wayback Machine Haaretz Daily Newspaper, 2011.
19. ↑ Las células madre demostraron su inutilidad en la lucha contra los infartos 14/11/2012 . Consultado el 15 de noviembre de 2012. Archivado desde el original el 16 de noviembre de 2012. (indefinido)
20. ↑ Por primera vez, los biólogos japoneses pudieron cultivar óvulos a partir de células madre y usarlos para obtener crías sanas en ratones . Consultado el 17 de enero de 2013. Archivado desde el original el 17 de noviembre de 2012. (indefinido)
21. ↑ Copia de archivo de la agencia RIA Novosti fechada el 7 de abril de 2013 en Wayback Machine (fecha de acceso: 24 de enero de 2013)  
22. ↑ "Monitoreo e inducción exitosa del mesodermo intermedio nefrogénico a partir de células madre humanas" Archivado el 4 de marzo de 2016 en Wayback Machine . Publicación del laboratorio de investigación en el sitio web de la Universidad de Kyoto, 23 de enero de 2013.  (  Consultado el 24 de enero de 2013)
23. ↑ Hamburguesa de probeta . Consultado el 5 de agosto de 2013. Archivado desde el original el 13 de agosto de 2013. (indefinido)
24. ↑ Los científicos hacen la primera hamburguesa con carne de laboratorio . Consultado el 7 de agosto de 2013. Archivado desde el original el 14 de agosto de 2013. (indefinido)
25. ↑ Los científicos hacen que las células madre sean "invisibles" para el sistema inmunitario por primera vez . RIA Novosti (20190218T1905+0300Z). Consultado el 19 de febrero de 2019. Archivado desde el original el 19 de febrero de 2019. (Ruso)
26. ↑ Sonja Schrepfer, Lewis L. Lanier, Mark M. Davis, Hermann Reichenspurner, J. Victor García. Los derivados hipoinmunogénicos de células madre pluripotentes inducidas evaden el rechazo inmunitario en receptores alogénicos totalmente inmunocompetentes  // Nature Biotechnology  . — Grupo editorial de la naturaleza , 2019-02-18. — Pág. 1 . — ISSN 1546-1696 . -doi : 10.1038/ s41587-019-0016-3 . Archivado desde el original el 4 de abril de 2019.
27. ↑ Alejandro Markov. La división asimétrica de células madre se acompaña de clasificación de histonas . Proyecto de divulgación científica "Elementos de la Gran Ciencia" (8 de noviembre de 2012). Consultado el 18 de mayo de 2018. Archivado desde el original el 19 de mayo de 2018. (indefinido)
28. ↑ SE DESCUBRE UN NUEVO TIPO DE CÉLULAS MADRE . Consultado el 7 de mayo de 2015. Archivado desde el original el 15 de mayo de 2015. (indefinido)
29. ↑ Vasyutin I.A., Lundup A.V., Kuznetsov S.L. Células madre aisladas de la orina: evaluación del potencial de diferenciación en células de músculo liso y células uroteliales  // Boletín de la Academia Rusa de Ciencias Médicas. - 2019. - T. 74 , núm. 3 , n º 3 . - S. 176-184 . — ISSN 0869-6047 2414-3545, 0869-6047 . -doi : 10.15690 / vramn1131 . Archivado desde el original el 2 de octubre de 2019.
30. ↑ Células madre / N. I. Mezen, Z. B. Kvacheva, L. M. Sychik. Minsk BSMU, 2014. S. 10 . Consultado el 18 de mayo de 2018. Archivado desde el original el 17 de mayo de 2018. (indefinido)
31. ↑ Introducción a los métodos de cultivo celular, bioingeniería de órganos y tejidos / V. P. Shakhov [y otros]. Tomsk, 2004. 385 págs.
32. ↑ Vermel, A. E. Células madre: características generales y perspectivas de uso en la práctica clínica / A. E. Vermel // Clinical Medicine. 2004. Nº 1. S. 5-11.
33. ↑ Investigación de KP: se extraen células madre de bebés asesinados . Consultado el 18 de mayo de 2018. Archivado desde el original el 19 de mayo de 2018. (indefinido)
34. ↑ Maksimova N., Krasheninnikov M., Zhang Y., Ponomarev E., Pomytkin I., Melnichenko G., Lyundup A. Las células estromales mesenquimales autólogas de paso temprano aceleran la reepitelización de heridas diabéticas: un estudio de caso clínico  // Citoterapia. - 2017. - doi : 10.1016/j.jcyt.2017.08.017 . Archivado desde el original el 21 de enero de 2022.
35. ↑ Tipos de células madre . Vizlit.ru . Consultado el 23 de mayo de 2019. Archivado desde el original el 7 de mayo de 2021. (indefinido)
36. ↑ Existencia comprobada de células madre cancerosas . Elementos.ru . Consultado el 12 de noviembre de 2012. Archivado desde el original el 19 de noviembre de 2012. (indefinido)
37. ↑ 1 2 Talentos, Pyotr Valentinovich . 0.05: Medicina basada en la evidencia desde la magia hasta la búsqueda de la inmortalidad. - M.  : AST : CORPUS, 2019. - 560 p. — (Biblioteca del Fondo Evolución). -LBC  54.1 . _ - CDU  616 . — ISBN 978-5-17-114111-0 .
38. ↑ ¿Abdulov, Zadornov y Hvorostovsky fueron asesinados por las mismas "inyecciones de juventud"? -7Days.ru . Consultado el 11 de mayo de 2018. Archivado desde el original el 11 de mayo de 2018. (indefinido)
39. ↑ "Baile sucio alrededor de la jaula" Copia de archivo fechada el 18 de mayo de 2018 en Wayback Machine , Bateneva T., periódico Izvestia, 2010.
40. ↑ Proyecto de ley federal "Sobre la aplicación de tecnologías celulares biomédicas en la práctica médica" Copia de archivo del 18 de mayo de 2018 en la revista Wayback Machine , Genes & Cells, 2010.
41. ↑ 18/10/2010 Tecnologías celulares permitidas en Rusia Copia de archivo del 22 de agosto de 2016 en Wayback Machine / Remedium
42. ↑ "La Duma estatal adoptó la ley sobre células madre en primera lectura" Copia de archivo fechada el 18 de mayo de 2018 en Wayback Machine , Shubina D., revista Vademecum, 2015.
43. ↑ “El jefe del Ministerio de Salud es uno de los autores de la ley sobre células madre” Copia de archivo fechada el 18 de mayo de 2018 en Wayback Machine , Dobryukha A., periódico Komsomolskaya Pravda, 2016.
44. ↑ Dossier sobre el proyecto de ley federal No. 717040-6 "Sobre productos celulares biomédicos" (presentado el 6 de febrero de 2015 por el Gobierno de la Federación Rusa) . Consultado el 18 de mayo de 2018. Archivado desde el original el 18 de mayo de 2018. (indefinido)
45. ↑ Ley Federal del 23 de junio de 2016 No. 180-FZ "Sobre productos celulares biomédicos" Copia de archivo del 18 de mayo de 2018 en Wayback Machine , Rossiyskaya Gazeta - Edición federal No. 7007 (139), 2016.
46. ↑ Buscar detalles :: Documentos reglamentarios :: Ministerio de Salud de Ucrania (enlace inaccesible) . Consultado el 11 de mayo de 2011. Archivado desde el original el 12 de octubre de 2014. (indefinido) 
47. ↑ Ucrania se convirtió en el primer país de la CEI en recibir el registro estatal para el tratamiento con células madre , Interfax-Ucrania (5 de abril de 2013). Archivado desde el original el 10 de septiembre de 2014. Consultado el 9 de septiembre de 2014.
48. ↑ ... sobre la Iglesia Ortodoxa Rusa, el aborto y las tecnologías celulares médicas Copia de archivo fechada el 4 de noviembre de 2012 en Wayback Machine // Konstantin SCHEGLOV, columnista de MG. Diario Médico, 13 de abril de 2012 (Demoscope No. 507-508, 16-30 de abril de 2012); "Diario médico", 13 de abril de 2012[ aclarar ]
49. ↑ Un proceso que involucra la extracción de una célula madre de un embrión humano en la etapa de blastocisto, lo que implica la destrucción de ese embrión, no puede ser patentado . Archivado el 19 de mayo de 2018 en Wayback Machine // Tribunal de Justicia de la Unión Europea. BOLETÍN DE PRENSA N° 112/11. Luxemburgo, 18 de octubre de 2011
50. ↑ Unión Europea: Tribunal prohíbe patentes cuando se destruyen embriones humanos | Monitor Legal Global . Consultado el 10 de agosto de 2016. Archivado desde el original el 21 de octubre de 2016. (indefinido)
51. ↑ Europa: Tribunal de Justicia Europeo decide sobre la patentabilidad de células madre embrionarias humanas | Grupo Reinhold Cohn . Consultado el 10 de agosto de 2016. Archivado desde el original el 21 de septiembre de 2016. (indefinido)
52. ↑ C-34/10 Archivado el 14 de marzo de 2021 en Wayback Machine : Directiva 98/44/CE - Artículo 6(2)(c) - Protección legal de las invenciones biotecnológicas - Extracción de células precursoras de células madre embrionarias humanas - Patentabilidad - Exclusión de 'usos de embriones humanos con fines industriales o comerciales' — Conceptos de 'embrión humano' y 'uso con fines industriales o comerciales'. SENTENCIA DEL TRIBUNAL DE JUSTICIA (Gran Sala) de 18 de octubre de 2011 Archivada el 19 de mayo de 2018 en Wayback Machine Sentencia en el asunto C‑34/10: “cualquier óvulo humano después de la fecundación […] constituye un 'embrión humano' en el sentido del artículo 6, apartado 2 (c) de la Directiva; (se considerarán no patentables: … (c) los usos de embriones humanos con fines industriales o comerciales;)”
53. ↑ Ewen Callaway y Alison Abbot . Un tribunal europeo allana el camino para las patentes de células madre Un fallo del Tribunal de Justicia de las Comunidades Europeas levanta la prohibición de 2011 de patentar células madre embrionarias obtenidas a partir de óvulos no fertilizados.  (inglés) , doi:10.1038/nature.2014.16610 , Nature News (18 de diciembre de 2014). Archivado desde el original el 10 de agosto de 2016. Consultado el 10 de agosto de 2016.  "En un comunicado de prensa, el tribunal europeo dijo: "El mero hecho de que un óvulo humano activado partenogenéticamente comience un proceso de desarrollo no es suficiente para que se lo considere un embrión humano".
54. ↑ Un organismo que es incapaz de convertirse en un ser humano no constituye un embrión humano en el sentido de la Directiva sobre biotecnología . Archivado el 11 de noviembre de 2020 en Wayback Machine /Tribunal de Justicia de la Unión Europea. 18 de diciembre de 2014, Sentencia en el Asunto C-364/13 International Stem Cell Corporation c. Contraloría General de Patentes, Diseños y Marcas

Enlaces

• "¿Qué son las células madre?" , L. I. Korochkin, revista Nature, 2005, No. 6.
• Anthony Atala (ed): Tecnologías y terapias de células progenitoras y madre . Publicación de Woodhead 2012
• Biología de las células madre y tecnologías celulares. Libro de texto para estudiantes de medicina, en 2 volúmenes, ed. académico RAS y RAMS M. A. Paltseva - 2009
• Boris Popov (2010) Introducción a la biología de células madre. ISBN 978-5-299-00430-4
• Dominici, MLBK, Le Blanc, K., Mueller, I., Slaper-Cortenbach, I., Marini, F.C., Krause, D.S., ... y Horwitz, E.M. (2006). Criterios mínimos para definir células estromales mesenquimales multipotentes. Declaración de posición de la Sociedad Internacional de Terapia Celular. Citoterapia, 8(4), 315-317. PMID 16923606 doi : 10.1080/14653240600855905
• Myret Ghabriel, Ahmed El Hosseiny, Ahmed Moustafa, Asma Amleh (2021). La transcriptómica comparativa identifica marcadores potenciales relacionados con el tallo para células madre/estromales mesenquimales . bioRxiv 2021.05.25.445659; doi: doi : 10.1101/2021.05.25.445659

sitios temáticos	FMA
diccionarios y enciclopedias	gran ruso italiano alrededor del mundo Britannica (en línea) universalis
En catálogos bibliográficos BNF : 11964831j TIERRA : 4665329-6 J9U : 987007534031405171 LCCN : sh85127923 NDL : 01143628 NKC : ph325855