ARNsh

Los ARN de horquilla pequeña o shRNA ( ARN de horquilla corta , ARN de horquilla pequeña, ARN de horquilla corta ) son moléculas de ácido ribonucleico cortas que forman horquillas densas (estructuras de bucle de tallo) en la estructura secundaria .  ShRNA se puede utilizar para suprimir la expresión génica a través de la interferencia de ARN . Los ARN de horquilla corta se introducen en las células utilizando vectores en los que sus secuencias codificantes están bajo el control de promotores constitutivamente activos (como U6) o inducibles . Dichos vectores suelen contener secuencias de nucleótidos que les permiten integrarse en el genoma celular y, por lo tanto, proporcionan una supresión hereditaria de la expresión del gen diana [1] .

Los ARN pequeños que forman una horquilla se transcriben mediante la ARN polimerasa III . La formación de shRNA en células de mamíferos a veces desencadena una respuesta de interferón para proteger la célula, como en el caso de un ataque viral . Tales procesos no se observan en el caso de los miRNAs ( miRNAs ), que son transcritos por la RNA polimerasa II [2] .

Una vez completada la transcripción, las enzimas celulares cortan los pequeños ARN en horquilla para formar pequeños ARN de interferencia ( siARN ) .  Los pequeños ARN de interferencia son parte del complejo de apagado de genes inducido por ARN (RISC). Este complejo se une a los mRNA que son complementarios a los siRNA y los corta.

Los ARN de horquilla pequeña también se usan en plantas. En este caso, el promotor CaMV35S constitutivamente activo del promotor 35S del virus del mosaico de la coliflor se utiliza tradicionalmente  [ 3 ] .

Notas

1. ↑ Paddison P., Caudy A., Bernstein E., Hannon G., Conklin D. Los ARN de horquilla corta (shRNA) inducen el silenciamiento específico de secuencia en células de mamíferos  // Genes Dev  .  : diario. - 2002. - vol. 16 , núm. 8 _ - Pág. 948-958 . -doi : 10.1101/ gad.981002 . —PMID 11959843 .
2. ↑ Cao W., Hunter R., Strnatka D., McQueen C., Erickson R. Las construcciones de ADN diseñadas para producir ARN de interferencia de horquilla corta en ratones transgénicos a veces muestran una letalidad temprana y una respuesta de interferón  //  J. Appl . Gineta. : diario. - 2005. - vol. 46 , núm. 2 . - pág. 217-225 . —PMID 15876690 .
3. ↑ McIntyre G., Fanning G. Diseño y estrategias de clonación para construir vectores de expresión de shRNA  //  BMC Biotechnol. : diario. - 2006. - vol. 6 _ — Pág. 1 . -doi : 10.1186/ 1472-6750-6-1 . —PMID 16396676 .  (enlace no disponible)